Анализ на чувствительность к антибиотикам при молочнице

Для лечения кандидозной инфекции важно сдавать анализ, определяющий чувствительность к антимикотическим препаратам. Обследование назначают при подозрении на молочницу и при хронических формах грибковой инфекции. Для этого делают специальный анализ — посев на кандиду с определением чувствительности конкретного возбудителя к грибковому антибиотику.

Когда необходимо определять чувствительность к антибиотикам и антимикотикам?

Ориентируясь на происхождение грибковой инфекции, исследуемой средой может быть мокрота, моча, гнойное отделяемое, кал, пункционные жидкости, раневое отделяемое. Проверяют и мазки из уретры, вагины, полости рта, уха, верхних дыхательных путей и пр.

Во избежание негативных последствий течения заболевания и перехода болезни в трудно излечимую хроническую стадию в идеале нужно по факту инфицирования делать бак посев на чувствительность к антимикотикам при обнаружении грибов и их спор в обычном мазке при вагинальном кандидозе, а также при любых других проявлениях грибковой инфекции. Кроме того, анализ назначают для контроля после проведенной терапии грибковой инфекции.

Посев на грибы рода Кандида помогает диагностировать факт инфицирования и определить концентрацию возбудителя, видовую принадлежность, а также чувствительность к противогрибковым препаратам. Определение фактора восприимчивости к лекарству — важный момент для рациональной терапии, так как грибковые патогены способны приспосабливаться и формировать резистентность к медпрепаратам.

Как это делают?

Диагностика болезени, вызванной Candida, в гинекологической практике проводится на основе микроскопического исследования мазка и посева на кандидоз. Определение чувствительности возбудителя к противогрибковым препаратам — важный фактор исследования заболевания. Дополнительными методами в обследовании выступают метод качественного определения ДНК (ПЦР-исследование) и определение lgG (метод ИФА-диагностики) с целью определения грибка Candida.

Бакпосев на грибковую инфекцию выполняется по следующей схеме с соблюдением правил (на примере мазка со слизистой половых органов):

• Стерильным тампоном выполняют взятие выделений из зоны заднего свода влагалища, которые помещают в пробирку с активной средой.
• Исследуемый материал берут до момента терапии антимикотическими препаратами.
• На всех этапах диагностики (от взятия материала, до транспортировки и лабораторного исследования) важно придерживаться особой стерильности.
• В лаборатории биологический материал размещают на специальную культурную среду, на которой при наличии возбудителя он будет расти и размножаться с образованием грибниц.
• При выявлении возбудителя определяют его тип и восприимчивость к антимикотику. Для этого в выращенные при посеве колонии грибов добавляют разнообразные противогрибковые медикаменты и проводят наблюдение, в каком препарате грибы продолжают развитие, а в каком происходит их полная или частичная гибель. На основе этого исследования определяется степень чувствительности конкретного вида возбудителя к медпрепарату.
• Материал исследуется в течение 3-х дней при отсутствии роста грибов и 6-ти дней при определении наличия возбудителя и его активности.

Вернуться к оглавлению

Как норму определяют полное отсутствие грибов, низкий титр или умеренное количество возбудителя в анализе. Небольшое количество патогена может указывать на бессимптомное носительство грибов Кандида. Интерпретация результатов может отличаться в разных лабораториях. Показатели наличия грибов и их расшифровка приведены в таблице.

Вернуться к оглавлению

Какие виды к чему устойчивы?

Показатели проводимых бакпосевов демонстрируют, что наличие Candida albicans составляет не более половины всех случаев заболеваний. Этот момент очень важен при проведении эффективной антимикозной терапии. При исследовании на наличие грибков была обнаружена следующая статистика по вероятности присутствия конкретного патогена:

• Candida albicans — до 45%;
• Candida non-albicans (среди них чаще всего присутствовали в мазке C. glabrata, C. krusei, C. tropicalis) — до 55%.

Общие сведения об анализе

Анализ на чувствительность к антибиотикам – лабораторный тест, который определяет тип возбудителя, общий объем патогенных сред. Перед тем, как сдавать анализ, требуется подготовиться. Обычно исследование назначают на утро. Пациентам не рекомендуется подмываться, промывать носовые ходы, умываться. Нельзя принимать антибиотики из-за риска получения ложных результатов. О том, как сдавать анализ правильно, расскажет лечащий врач.

Анализ на чувствительность к антибиотикам показан для изучения типа бактерий, определения медикаментозной терапии.

Основная цель заключается в определении типа бактерии, ее устойчивости или чувствительности к различным группам антибиотиков.

Показания и исследуемые пробы

Основными показаниями к назначению анализа являются острые воспалительные процессы бактериальной природы и составление плана дальнейшего ведения пациента. Анализ применяется в хирургии, урологии, нефрологии, онкологии других отраслях медицины.

Исследуемый биологический материал зависит от текущего клинического анамнеза пациента, локализации воспалительного очага. При обширном сепсисе рекомендуется развернутое изучение всех биологических материалов. Для исследования подходят:

1. Кровь. Биохимический развернутый гемотест помогает определить не только тип возбудителя, но и общее состояние организма в целом.
2. Урина. Бакпосев мочи проводится для уточнения половых инфекций, воспаления почек, органов урогенитальных путей.
3. Анализ кала. Применяется в отношении пациентов с воспалением кишечного тракта, осложнениями острых кишечных инфекций, подозрением на паразитарные инфекции. Одновременно изучают физические и химические параметры каловых масс.
4. Мазок из цервикального канала у женщин. Метод исследования помогает определить инфекции половых путей.
5. Исследование спермы, мазок из уретры, секрет простаты. Анализы на бактериальный посев применяются для уточнения инфекций различной локализации у мужчин.
6. Анализ мокроты. Помогает в диагностике дыхательных заболеваний, туберкулеза легких, пневмонии. Одновременно оценивают количество примесей — гноя, крови, слизи.

При хронических патологиях респираторного тракта и дыхательной системы возможно проведение забора мазка из носовых ходов, гортани. Анализ широко распространен в педиатрии ввиду легкости забора биологического материала.

Методы изучения материалов

Бакпосев выполняется несколькими способами, среди которых диско-диффузионный метод, Е-тест, метод разведения. В каждом случае выполняется определенный тип теста.

Дисковый способ

Распространенный и простой способ определения типа бактериальной микрофлоры. Исследуемый материал размещают в чаше Петри по всей поверхности, помещают небольшие картонные диски, смоченные в определенном виде антибиотика. После чашу плотно закрывают и устанавливают в термостат при температуре человеческого тела на 12 часов.

Бакпосев мочи назначается при подозрении на инфекции мочеполовых путей и урогенитального тракта

Под воздействием диффузных процессов антибактериального препарата формируется зона подавления патогенной микрофлоры. По окончанию анализа производят замер диаметра выявленной зоны подавления.

E-тест

Способ бакпосева похож на диско-диффузный, однако, вместо картонных дисков в чашу помещают специальную шкалу-полоску с различной интенсивностью пропитки антибиотиком. Посев инкубируют около 12 часов, после чего оценивают эффективность каждой пропитанной зоны полоски. Выбор антибиотика по результату теста зависит от выраженности зоны подавления на определенном участке полоски. Е-тест простой и доступный метод тестирования, но отличается высокой стоимостью.

Методы разведения

Анализ основан на последовательном двойном разведении антибиотика от максимальной к минимальной концентрации. 1 мл биоматериала разбавляют 10 раз в 10 пробирках с питательной средой. В той пробирке, где прекращается рост патогенной микрофлоры, обозначают максимальной границей количества патогенов в пробе. Этот же метод применяется для выявления чувствительности к антибиотикам.

Минимальная бактерицидная концентрация (МБК)

Минимальная бактерицидная концентрация — наименьшая концентрация антибактериального вещества, которая уничтожает патогенные бактерии на 100%. Показатель МБК учитывают и в лечении тех пациентов, у которых отсутствует эффективность от ранее назначенной этиотропной терапии. Анализ на флору и МБК особенно применяют на фоне остеомиелита, генерализованного сепсиса или воспаления, бактериального миокардита, эндокардита.

Современные лаборатории оснащены необходимым оборудованием для определения типа и чувствительности бактерий. Получение результатов занимает 1-2 суток, что зависит от транспорта полученного материала и вида исследования.

Расшифровка результатов

Для определения чувствительности антибиотика оценивают зоны подавления роста колоний патогенных штаммов. Категории резистентности непостоянны, поэтому регулярно пересматриваются из-за изменения чувствительности к антибактериальным препаратам.

Анализ на флору постоянно применяется в различных медицинских сферах

Мутация патогенов вызвана и беспорядочным применением антибиотика без дополнительных исследований. Клиницисты выделяют несколько видов интерпретаций:

Оценка клинического метода основана на эффективности действия того или иного препарата. Микробиологическая интерпретация основана на распределении концентрации антибиотика и степени подавления патогенной активности в каждой концентрации. Благодаря микробиологической интерпретации подбирается доза препарата для достижения высоких терапевтических результатов.

Расшифровка по типу возбудителя

Проведение анализа на чувствительность к антибиотикам необходимо и при неясной природе воспалительного процесса. Учитывая, что после приема антибактериальных препаратов, патогенные штаммы могут мутировать, изменять состояние, то микроорганизмы классифицируют на устойчивые, чувствительные, условно-чувствительные.

Устойчивые

Устойчивые или резистентные бактерии характеризуются дальнейшим ростом и патогенной активностью даже на фоне приема максимальных доз препарата. В этом случае требуется длительное лечение, назначение комбинированных антибиотиков с различными концентрациями.

Условно-чувствительные

Условно-чувствительные или промежуточно-резистентные бактерии провоцируют различный терапевтический исход. Лечебный эффект достигается, благодаря повышению суточной дозы препарата, постоянной коррекции концентрации антибиотика.

В отдельных случаях резистентные и промежуточно-чувствительные бактерии объединяются в одну группу устойчивых штаммов. Лечение в таком случае носит эмпирический характер. Назначение минимальные дозы с их постепенным повышением. К таким возбудителям относятся хламидии, уреаплазма, микоплазма.

Чувствительные

Чувствительность бактерий к антибиотику характеризуется быстрым подавлением патогенной активности под воздействием минимальных или стандартных возрастных доз препарата. Для выздоровления достаточно одного медикаментозного курса.

Исходя из этой классификации, назначение антибиотиков не оправдано только на основании предъявляемых жалоб и клинической картины. Именно поэтому показано проведение бакпосева.

Полученные результаты исследования на бакпосев имеют клиническую значимость только на момент острого периода воспалительного процесса. Таким образом, при рецидиве инфекции через определенное время картина может значительно измениться, а назначенный ранее антибиотик станет неэффективным. При каждом обострении хронической инфекции показано проведение нового анализа.

Микробиологическое исследование, в ходе которого определяют наличие и видовую принадлежность дрожжеподобных грибов рода Candida , используемое для диагностики и контроля лечения кандидоза слизистых оболочек.

Кандидоз полости рта, генитальный кандидоз. Посев на среду с определением вида гриба и его резистентности к противогрибковым препаратам.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок из десневого кармана.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не проводить туалет полости рта в день взятия биоматериала на исследование.

Общая информация об исследовании

Кандидоз слизистой – это инфекционно-воспалительный процесс, вызываемый дрожжеподобными грибами рода Candida, на слизистых оболочках. Наибольшее клиническое значение имеет кандидоз полости рта и генитальный кандидоз.

Дрожжеподобные грибы рода Candida (Candida spp.) считаются представителями нормальной микробиоты слизистых организма человека. Действительно, дрожжевые грибы могут быть выявлены примерно у 60 % взрослых здоровых людей в полости рта и у 12 % женщин во влагалище. В норме дрожжевые грибы находятся в равновесии с бактериальными комменсалами слизистых оболочек и не вызывают никаких воспалительных изменений («здоровое носительство»). В некоторых ситуациях, однако, рост дрожжевых грибов усиливается, что сопровождается возникновением локального инфекционно-воспалительного процесса – кандидоза, который также известен под названием «молочница». Чаще всего причиной кандидоза слизистых является C. albicans, однако все большее значение приобретает кандидоз, вызванный другими видами этого рода – C. glabrata, C. dubliniensis, C. krusei и др.

Кандидоз слизистых встречается очень часто. Факторами риска кандидоза полости рта являются младенческий и пожилой возраст, наличие тяжелых заболеваний с иммунодефицитом (особенно лейкоз, лимфомы, карциноматоз и ВИЧ), недостаточная гигиена полости рта, синдром Шегрена, сахарный диабет и другие эндокринологические заболевания, ношение зубных протезов, применение ингаляционных и системных глюкокортикоидов. Факторы риска генитального кандидоза (вульвовагинита) менее ясны, однако предполагается значение нарушения баланса эстрогенов и применения антибиотиков.

Клиническая картина кандидоза слизистых достаточна характерна (наличие крошковатых налетов белого цвета на фоне гиперемии при псевдомембранозной форме кандидоза), однако она может напоминать другие заболевания, в первую очередь лейкоплакию и красный плоский лишай. Для дифференциальной диагностики этих заболеваний проводят лабораторные тесты.

Существует несколько способов идентификации дрожжеподобных грибов: микроскопия окрашенного по Граму или с помощью метиленового синего мазка/соскоба, микроскопия мазка/соскоба после обработки раствором гидроксида калия KOH, микроскопия нативного мазка (для вульвовагинита) и посев на среду (микробиологический метод).

Посев на среду – это самый точный метод диагностики. С помощью этого метода удается не только выявить дрожжеподобные грибы, но и определить конкретный вид гриба и его количество, а также его чувствительность к противогрибковым препаратам. Определение видовой принадлежности культуры микроорганизмов, в том числе грибов, называется выделением «чистой культуры». Выделение чистой культуры и определение чувствительности к противогрибковым препаратам имеет особое значение при наличии у пациента резистентного к стандартной (эмпирической) антимикотической терапии кандидоза или при рецидивирующем течении заболевания. Исследование может применяться как для первичной диагностики, так и для оценки эффективности лечения заболевания.

С учетом большой распространенности «здорового носительства» грибов рода Candida, у многих людей при микробиологическом исследовании может быть определен незначительный рост дрожжеподобных грибов. При отсутствии каких-либо клинических признаков кандидоза такой рост не имеет никакого клинического значения. С другой стороны, обилие колоний дрожжевых грибов (более 10 4 КОЕ/мл) у пациента с минимальными признаками кандидоза или вовсе без них, но с факторами риска этого заболевания должно насторожить врача и, возможно, потребует назначение антимикотических препаратов. В этом случае дополнительным диагностическим исследованием, которое может существенно помочь при интерпретации результатов, является микроскопия — определение в мазке множества делящихся дрожжеподобных грибов свидетельствует в пользу кандидоза.

С учетом того, что иногда кандидоз слизистой (в первую очередь, полости рта) является симптомом более серьезного заболевания, в некоторых случаях могут быть рекомендованы дополнительные лабораторные тесты, в том числе анализ глюкозы крови, определение гормонов щитовидной, паращитовидной, половых желез и надпочечников, анализ на ВИЧ и иммунологические исследования. Более широкое лабораторное обследование также показано при наличии хронического кандидоза кожи и слизистых. Следует отметить, что генитальный кандидоз не относится к числу инфекций, передающихся половым путем (ИППП), поэтому при выявлении этого заболевания у пациента обследование его половых партнеров не показано.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики и контроля лечения кандидоза слизистых оболочек.

Когда назначается исследование?

• При наличии признаков кандидоза слизистых оболочек: жжения, болезненности, зуда, наличия крошковатых налетов белого цвета на фоне гиперемии;
• при наличии факторов риска кандидоза полости рта: младенческий и пожилой возраст, наличие тяжелых заболеваний с иммунодефицитом (лейкоз, лимфомы, карциноматоз и ВИЧ), недостаточная гигиена полости рта, синдром Шегрена, сахарный диабет и другие эндокринологические заболевания, ношение зубных протезов, применение ингаляционных и системных глюкокортикоидов.

Что означают результаты?

Выдается результат по грибам рода Candida — обнаружены/не обнаружены + результат по микроскопии (наличие нормальной микрофлоры/ клетки эпителия, лейкоциты, палочки, кокки и т.д.).

• кандидоз слизистых;
• «здоровое носительство».

• норма;
• эффективное лечение противогрибковыми препаратами.

Что может влиять на результат?

• Применение противогрибковых препаратов (флуконазол, итраконазол) может приводить к ложноотрицательному результату.



• При отсутствии каких-либо клинических признаков кандидоза незначительный рост колоний гриба (менее 10 4 КОЕ/мл) не имеет клинического значения;
• иногда кандидоз слизистой (в первую очередь, полости рта) является симптомом более серьезного заболевания, поэтому могут быть рекомендованы дополнительные лабораторные тесты.

Кто назначает исследование?

Терапевт, дерматовенеролог, врач общей практики.

Литература

1. Gonsalves WC, Chi AC, Neville BW. Common oral lesions: Part I. Superficial mucosal lesions. Am Fam Physician. 2007 Feb 15;75(4):501-7.
2. Burns T., Breathnach S., Cox N., Griffiths C. Rook’s Texbook of Dermatology / T. Burns, S. Breathnach , N. Cox, C. Griffiths; 8th ed. – Wiley-Blackwell, 2010.

Описание

Посев на Candida с определением чувствительности к антимикотическим препаратам — исследование, которое проводится для выявления родовой принадлежности грибов Candida и определения их чувствительности к противогрибковым препаратам.

Выделяемые возбудители: дрожжеподобные грибы (род Candida, Cryptococcus и другие).

Определение чувствительности к антибиотикам проводится при выявлении роста 10*4 и более кое/мл.

Дрожжевые грибы рода кандида — нередкий обитатель генитального тракта. В небольшом количестве эти грибы присутствуют на слизистых оболочках рта, желудочно-кишечного тракта, влагалища, не вызывая каких-либо клинических проявлений. При нарушении иммунитета, действия лекарств, ожогах, хирургических вмешательствах, у онкологических больных — они могут явиться причиной ряда заболеваний — стоматита, гнойных заболеваний, молочницы (бактериальный вагиноз), негонорейного уретрита, пневмонии у новорожденных, системного кандидоза (монилиаза).

Клинические проявления кандидоза
Клинические проявления кандидоза: у женщин — жжение и зуд в половых органах, творожистые выделения, боли при мочеиспускании; у мужчин — зуд и жжение, белый налет на головке полового члена и крайней плоти, боли при мочеиспускании.

Дополнительная информация: для сдачи посева на Candida с определением чувствительности к антимикотическим препаратам, необходимо иметь при себе паспорт.

Показания:

• подозрение на грибковую инфекцию и контроль после лечения.

Подготовка
Желательно проводить исследование до начала лечения противогрибковыми препаратами. Воздержаться на 1–2 суток от половых контактов. Не применять вагинальные препараты (свечи, крема, смазки) и не делать спринцевание в течение 1–2 суток. Исключить дополнительные методы исследований (кольпоскопия, УЗИ вагинальным датчиком) за 1–2 суток, а также осмотр гинеколога перед взятием образцов.

Обследование женщин целесообразно проводить в первую половину менструального цикла, не ранее 5-ого дня. Допустимо обследование во второй половине цикла, не позднее, чем за 5 дней до предполагаемого начала менструации. При наличии патологических изменений, взятие материала проводится в день обращения. Накануне и в день обследования, пациентке не рекомендуется выполнять спринцевание влагалища. Не рекомендуется взятие биоматериала на фоне проведения антибактериальной терапии (общей/местной) и во время menses, ранее 24–48 часов после полового контакта, интравагинального УЗИ и кольпоскопии. Если для исследования берут соскоб из уретры, сбор материала проводят до или не ранее 2–3 часов после мочеиспускания.

Интерпретация результатов
Даётся информация:

• об отсутствии или наличии роста;
• о количестве выросших в посеве грибов рода кандида и криптококков;
• о видовой принадлежности;
• о чувствительности к антимикотическим препаратам (если количество более 10 4 КОЕ/тампон, грамм, мл).

Референтные значения: в норме результат отрицательный.
При бессимптомном носительстве — низкий титр 4 КОЕ/тампон, грамм, мл.
При патологии — титр возбудителя более 10 4 КОЕ/ тампон, грамм, мл.