Цитологическое исследование шейки матки для эко

Для того, чтобы обнаружить начало патологического процесса, контролировать его протекание, оценивать эффективность терапии, необходимо понимать, каким изменениям подвергается клетка при развитии патологии.

Это стало возможным с появлением такой диагностики, как цитологическое исследование.

В настоящее время имеется тенденция к увеличению заболеваемости онкологией, особенно половой сферы женщины. Каждый год онкозаболевание регистрируется у 12 миллионов человек, из них миллион – женщины, у которых обнаружили рак репродуктивных органов, 45 тысяч – это россиянки. Рак шейки матки возникает ежегодно примерно у 2250 женщин России. Выявить заболевание и поставить точный диагноз позволяет цитологическое исследование шейки матки.

Суть метода

В основе цитологического исследования мазка шейки матки находится микроскопическое изучение клеток. Под микроскопом оценивается жизнедеятельность, состав, строение клетки, ее соответствие нормальному развитию.

Диагностика позволяет оценить клеточные структуры, по состоянию которых можно судить о здоровье или развитии заболевания:

Клеточное ядро – основа, содержащая молекулы ДНК с наследственной информацией.
Цитоплазма или саркоплазма у клеток мышц – цитозоль (жидкость), содержащая органеллы (жизненно необходимые компоненты клетки), в цитоплазме находится ядро.
Митохондрии – компоненты, отвечающие за энергетические процессы.
Ферменты – катализаторы химических реакций белковой природы.
Лизосомы – ферментная оболочка, функцией которой является расщепление различных веществ.
Рибосомы – участвуют в формировании аминокислот и молекул белка, которое обусловлено генетической информацией.
Мембрана – оболочка, которая сохраняет клетку, обеспечивает ее целостность, регулирует внутриклеточный баланс, транспортирует различные вещества, блокирует поступление других, таким образом обеспечивая стабильность внутриклеточной среды.

Благодаря цитологическому исследованию шейки матки раннее обнаружение онкозаболеваний шейки матки и придатков на доклиническом этапе повысилось в 10 раз.

Выявление рака на первых стадиях и предраковых состояний является главной целью цистоскопии. Это наиболее информативный метод диагностики, позволяющий оценить состояние органа и прилегающих тканей.

Цитологическое исследование сходно с гистологическим по целям (распознавание патологии), объекту диагностики (клетки патологически измененных тканей), принципу (морфологический анализ), способам окраски клеточных структур.

Однако для цистоскопии нужно меньшее количество биоптата, намного меньше времени для получения результатов, зачастую не требуется предварительная обработка материала, особая аппаратура.

Показания

Назначить обследование может не только гинеколог, но другой узкий специалист (онколог, хирург, репродуктолог), а также терапевт.

С помощью цитологического исследования шейки матки решаются следующие задачи:

Предварительное обследование для выбора дальнейшего комплекса диагностики, в том числе с целью предотвращения рискованных для пациента диагностических процедур.
Профилактический скрининг, особенно для группы пациентов с повышенным риском возникновения онкозаболеваний шейки матки.
Оценка реакции организма на цитостатические препараты, облучение, комбинацию химио- и лучевой терапии.
Уточнение или установление диагноза при повреждениях тканей шейки матки.
Обоснование целесообразности хирургического вмешательства.
Подозрение на раковое поражение шейки матки.
Подозрение на воспалительный процесс или ЗППП.
Подозрение на предопухолевое заболевание.
С помощью цитологического исследования шейки матки оценивают терапевтический эффект применяемых лекарственных средств, возможность поменять препарат на более эффективный или откорректировать дозировку.
Подозрение на ВПЧ.
Наблюдение за протеканием онкопатологии или воспаления.
Сравнение с результатами патогистологического исследования.
Выбор оптимального комплекса лечебных процедур.
Благодаря цистоскопии, проведенной при хирургическом вмешательстве, можно быстро уточнить диагноз и на основании результатов изменить тактику операции.
Раннее выявление рецидивов и изменений, которым подверглась шейка матки.
В целях научных экспериментов и исследований.
Жалобы на зуд в области половых органов, жжение, нетипичные выделения, появление неприятного запаха, расстройство цикла.
Беременность.
Подготовка к программе экстракорпорального оплодотворения.

В некоторых сложных случаях, например, при невозможности выполнить биопсию, цитологическое исследование шейки матки является единственным вариантом точной постановки диагноза.

Преимущества и возможности

С помощью цитологического исследования шейки матки можно выявить:

Раковую опухоль на любой стадии и предопухолевое состояние.
Эрозивные изменения шейки матки.
Дисплазию (аномальное изменение клеток поверхностного слоя), поздние стадии дисплазии (2 и 3) считаются предраковым состоянием, требующим срочного лечения. На первой стадии помогает медикаментозное лечение, но наблюдаться у гинеколога и регулярно проходить цистоскопию в обязательном порядке – минимум раз в полгода, желательно – раз в три месяца.
Папилломатоз.
Вид бактерий, вирусов, паразитов, грибков.
Определить состав микрофлоры шейки матки.
Воспаление шейки и цервикального канала (цервицит, эндоцервицит).
Фоновые болезни.
Определить степень разрастания атипичной ткани.
Гистологический тип опухолей, доброкачественных и злокачественных.
Оценить чувствительность атипичных клеток к химиопрепаратам, иммунопрепаратам.
Оценить скорость и степень заживления раневой поверхности на шейке.
Возможность наблюдения клеточных изменений в динамике.
Болезни, передающиеся посредством сексуального контакта.

К преимуществам цитологического исследования шейки матки относится оперативность, безболезненность, безопасность. Это неинвазивная методика, не оставляющая при получении биоматериала ран, шрамов, рубцов, не вызывающая кровотечений и неприятных ощущений.

Психологически пациентка легче переносит и ей проще настроиться на цистоскопию, чем на гистологическое исследование.

Материал для анализа, подготовка

Шейка матки короткая (3-4 см), располагается между влагалищем и телом матки, состоит из влагалищной части и цервикального канала. Части шейки имеют разную поверхность: канал выстлан цилиндрическим эпителием (эндоцервикс), влагалищный отдел – плоским эпителием (экзоцервикс). На границе этих двух поверхностей, развиваются воспалительные процессы, появляются участки перерождения эпителия из одного вида в другой. С этого участка, с влагалищного отдела, с пораженных зон берется материал для цитологического исследования шейки матки.

Поверхностный легкий соскоб из обозначенной зоны делается специальной щеточкой, зондом, шпателем или ватным тампоном, помещают на стекло, предварительно обезжиренное и высушенное. Толщина стекла – 2 мм. Наносят мазок тонким слоем широкой полоской в одном направлении. Если шейка матки здорова, понадобиться одно стекло, в остальных случаях – несколько стекол. При патологических изменениях первый мазок, взятый со здоровой ткани, наносится на одно предметное стекло, второй мазок-отпечаток берется с зоны поражения и наносится на другое стекло. Для высушивания материала достаточно комнатной температуры. После высушивания, стекла и направление с данными пациентки, предварительным диагнозом отправляются в лабораторию не позднее четырехдневного срока с момента забора биоматериала.

Доставлять мазок в лабораторию для цитологического исследования шейки матки можно не только на стекле, но и с помощью транспортной жидкости. Соскоб берут цитощеткой, проворачивая ее по часовой стрелке 5 раз. Наконечник со щетки снимают и помещают его в контейнер с консервирующим многослойным препаратом. Контейнер закрывают, встряхивают, маркируют, отправляют в лабораторию.

Такой способ позволяет полностью сохранить материал с помощью жидкостного фиксатора, который повышает четкость структур клетки, а также исключает появление в биоматериале посторонних микрочастиц, чего нельзя исключить при сушке мазка на воздухе.

Жидкая цитология более качественная, биоптат хранится в консерванте 10 суток.

К сдаче мазка для цитологического исследования шейки матки нужно готовиться:

Двухдневное отсутствие секса перед анализом.
Отсутствие менструации.
Исключается кольпоскопия за двое суток.
Исключается использование вагинальных свечей, препаратов, тампонов, лубрикантов, вагинальных контрацептивов, спринцеваний.
Не берется мазок во время терапии ЗППП и воспалений половых органов.

Забор материала занимает несколько минут.

Варианты исследования

Шейка матки исследуется с помощью цитологического метода, который входит в обязательный комплекс диагностических процедур при гинекологических заболеваниях.

В разных лабораториях используются разные варианты цитологического исследования шейки матки:

Световая микроскопия – для диагностики используют наноскоп (оптический микроскоп). Важна прозрачность (полупрозрачность) исследуемого образца, чтобы луч прошел сквозь материал. Плюсы световых микроскопов: увеличение клетки до 3000 раз, это позволяет анализировать клетки размером 200 нанометров и более, возможность детального изучения жизнедеятельности клетки (деление, движение, перемещение, общая структура и так далее). Точность методики около 100%. Минус: нельзя проанализировать клетки меньше 200 нанометров.
Электронная микроскопия – вместо световых лучей для получения изображения используется электронный пучок. Изображение, выводимое на экране в ходе процедуры, увеличивается до 50000 раз. Разрешающая способность электронного аппарата превышает такой же показатель человеческого глаза в 106 раз. Чтобы получить более четкое изображение, иногда биоптат обрабатывают солями тяжелых металлов. Результат – клеточные структуры поглощают электроны с разной степенью, что выделяется на экране или пленке. Это позволяет более четко исследовать клеточные микрообъекты, выделить вирусы.

Центрифугирование (цитохимический анализ) – позволяет анализировать химический состав органелл. Биоматериал дробят в гомогенизаторе, загружают в центрифугу, запускают. Органеллы расслаиваются, разделяются на компоненты, которые подлежат изучению.
ПАП-тест – шейка матки исследуется с помощью теста Папаниколау, самого распространенного среди цистоскопии, имеющего эффективность около 100%, заключающегося в центрифугировании.
Рентгеноструктурное исследование – клетки выращивают в питательной среде, после чего изучаются белковые цепочки, ДНК клетки, РНК.
Микрохирургический способ – удаление или введение в клетку определенных органелл.

Методы обследования шейки матки делятся на сложные и простые, это зависит от окраски мазка. При сложных методах применяют многоцветную комбинированную окраску (полихромную). При простых методах для окраски используется одно красящее вещество (фуксин, метиленовый синий, гематоксилин-эозин).

Результаты

Любые методики цитологического исследования шейки матки очень точные, результативность приближена к 100%. При отсутствии патологии не получают ложноположительный результат в 99% случаях. При срочной необходимости результат обследования будет готов в течение часа, в обычных случаях – через 3-4 дня. Пациентке выдают бланк, там будут личные данные, исследованный вид материала, метод диагностики, результат.

Если мазок оценивался по классификации Бетесда, то будут такие показатели:

NILM – нормальный эпителий.
ASCUS – атипичное строение клеток плоского эпителия неустановленного происхождения.
ASC-Н – атипичные клетки с высокой степенью изменений внутри эпителия.
LSIL – низкая степень внутриэпителиальных изменений.
AGC – атипичные клетки железистого эпителия.
AGC, favor neoplastic – вероятное злокачественное перерождение эпителия.

Если мазок оценивался по системе Папаниколау, то будут такие показатели:

1-й класс – нормальный эпителий.
2-й – незначительные морфологические изменения.
3-й – выраженные морфологические изменения.
4-й – атипичные клетки, вероятно онкозаболевание.
5-й – анализ положительный (то есть рак подтверждается).

Если в мазке обнаружены патогенные микроорганизмы, то их вид также будет указан в результатах анализа.

В среднем процесс развития РШМ занимает 15–20 лет. При серьезных нарушениях работы иммунной системы (действительно серьезных, таких как ВИЧ -инфекция) он может ускориться – но и в этом случае речь идет о 5–10 годах. Заподозрить предраковые изменения клеток ( дисплазию ), ориентируясь на свое состояние, женщина не сможет, поскольку даже сам рак шейки матки на ранних стадиях часто протекает бессимптомно.

Дисплазия – обратимый процесс. Это значит, что если вовремя обнаружить атипичные клетки и пройти лечение, онкологического заболевания можно избежать. Раньше для этого повсеместно использовался Pap-тест (тест Папаниколау) – микроскопическое исследование соскоба из цервикального канала при помощи специального окрашивания. Тест назван по имени автора – греческого ученого Георгиоса Папаниколау, предложившего метод в 1943 году. Несмотря на то, что в Америке внедрение теста почти сразу снизило смертность от рака шейки матки на 70%, сегодня его нельзя считать идеальным. Хотя Pap-тест способен выявить ранние признаки РШМ в 95% случаев, процедура взятия клеточного материала и выполнения исследования не исключает ложноотрицательных или ложноположительных результатов. К ним может привести, например, загрязнение соскоба клетками крови или неравномерное нанесение на предметное стекло.

Сегодня используется более точный тест – жидкостной цитологический анализ (Liquid Based Cytology — LBC), который был разработан в США в 1996 году. Он основан на использовании специальных цитощеток, при помощи которых клетки эпителия шейки матки помещают в специальную жидкую среду: она обеспечивает целостность клеток и длительное хранение полученного материала. В лаборатории на стекло его наносят машины, а не человек: это позволяет снизить процент некачественных мазков и получить тонкослойные препараты, которые при необходимости можно исследовать дополнительными методами (например, для выявления вируса папилломы человека). Наиболее эффективным метод делает технология, при которой биоматериал анализируется не вручную, а автоматически: компьютер сравнивает клетки по 300 разным показателям и направляет подозрительные участки под микроскоп врача-цитолога. Система автоматического скрининга концентрируется не только на явных признаках рака – она способна распознавать изменения клеток на четырех разных стадиях, в том числе самых ранних.

Как расшифровываются результаты анализа

• ASC-US – присутствуют клетки плоского эпителия с атипией неясного значения. При таком результате нужны уточняющие исследования, которые помогут выяснить причины появления атипичных клеток. Ими могут быть вирус папилломы человека высокого или среднего онкогенного риска, другие бактерии или вирусы.

• LSIL – низкая степень плоскоклеточного интраэпителиального поражения. Изменения в клетках есть, но незначительные. При получении такого результата потребуется дополнительное инструментальное обследование – кольпоскопия. Если оно не выявит патологий, жидкостную цитологию нужно будет выполнять регулярно – через каждые 6, 12 или 24 месяца (по решению лечащего врача-гинеколога). Параллельно нужно будет провериться на инфекции, передаваемые половым путем, и вылечить заболевания, если они есть.

• Cancer – плоскоклеточная или эндоцервикальная карцинома или другие злокачественные опухоли. Для уточнения и постановки диагноза в этом случае потребуются дополнительные исследования: биопсия или иммуноцитохимическое исследование.

Минздрав РФ рекомендует всем женщинам регулярно проходить цитологическое исследование: с 21 года до 49 лет – 1 раз в 3 года, с 50 до 65 лет – 1 раз в 5 лет, после 65 лет – по решению врача-гинеколога. Чаще повторять процедуру нужно только тем, у кого уже были получены неблагоприятные результаты или есть некоторые заболевания, повышающие риск развития рака шейки матки. В первую очередь, это инфицирование онкогенными типами вируса папилломы человека и нарушения работы иммунной системы.

В некоторых случаях, например, при дисплазии, жидкостную цитологию нужно совместить с иммуноцитохимическим исследованием – изучением внутреннего строения клеток с помощью специальных способов окраски. Во время такого исследования проверяют наличие особых белков-антигенов p16ink4 и Ki67 – это специфические маркеры рака шейки матки. Анализ поможет понять, производят ли атипичные клетки эти антигены, где именно они расположены, насколько их много. Так, Ki67 показывает, какой процент опухолевых клеток активно делится. Это позволяет понять, насколько быстро растет новообразование, есть ли риск появления метастаз, определиться с тактикой терапии и вероятным ответом на нее , прогнозом заболевания. Тест на p16INK4a дает более подробную информацию об опухоли и помогает конкретизировать состояние клеток.