для диагностики мастита у коров
I. ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ
1. Масттест-АФ (Masttest-AF) — диагностическое средство в форме раствора, предназначенное для диагностики мастита у коров.
2. По внешнему виду препарат представляет собой жидкость темно-зеленого цвета. Допускается наличие незначительного осадка.
Масттест-АФ хранят в защищенном от света месте при температуре от 5 до 25 °С. Срок годности препарата при соблюдении условий хранения — 1 год со дня изготовления. Запрещается использовать препарат после окончания срока его годности.
II. ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
4. Сульфанол, как поверхностно-активное вещество, взаимодействуя с ДНК ядер соматических клеток молока, образует сгусток различной плотности, содержание которого в молоке увеличивается при наличии воспаления вымени. Одновременно в связи с изменением pH молока под действием индикатора изменяется цвет смеси от темно-зеленого до синего.
5. По степени воздействия на организм Масттест-АФ согласно ГОСТ 12.1.007 относится к веществам малотоксичным (4 класс опасности).
III. ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ
6. Масттест-АФ применяют для диагностики мастита и оценки результатов лечения путем постановки качественной реакции с образцом молока из разового удоя коровы во время контрольных доек. Исследования проводят с первого дня после отела, в период лактации и запуска.
7. Исследования проводят на молочно-контрольных пластинах ПМК-2. В углубление пластины пипеткой вносят 1 мл молока, добавляют 1 мл Масттеста-АФ и перемешивают путем вращения пластины в горизонтальной плоскости 10-15 секунд.
8. Реакцию учитывают по степени образования желеобразного сгустка, который является основным критерием оценки реакции с диагностикумом, и по изменению цвета смеси. Реакцию считают отрицательной (-), если смесь молока с Масттестом-АФ остается в виде однородной жидкости, а цвет смеси от желтого до желто-оранжевого. Реакцию считают сомнительной, если смесь молока с диагностикумом еле заметно загустевает или образует несформировавшееся желе (+/-), а цвет смеси от светло-зеленого до зеленого. Реакцию считают положительной, если смесь молока с диагностикумом образует сформировавшийся желеобразный сгусток, который легко выскальзывает из лунки (+) или плотный сгусток, с трудом выбрасываемый из лунки пластинки (++), а цвет смеси от темно-зеленого до синего.
9. При наличии положительной реакции молока у коров исследуют паренхимное молоко из каждой четверти вымени с помощью Масттеста-АФ, разведенного водой в соотношении 1:4. Для этого в стеклянную колбу вместимостью1 литр вносят 100 мл Масттеста-АФ и 400 мл дистиллированной или чистой водопроводной воды и тщательно перемешивают.
Реакцию проводят также, как при использовании Масттеста-АФ. Реакцию считают положительной, если смесь молока с диагностикумом образует сформировавшийся желеобразный сгусток, который легко выскальзывает из лунки (+) или плотный сгусток, с трудом выбрасываемый из лунки пластинки (++), а цвет смеси от темно-зеленого до синего.
10. Для дифференциации субклинического мастита от раздражения вымени, проходящего без лечения, необходимо через 1-2 дня провести повторное исследование. Если реакция сохранилась, животное считают больным и проводят соответствующее лечение.
IV. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
11. При работе с препаратом следует соблюдать общие правила личной гигиены и техники безопасности, предусмотренные при работе с лекарственными средствами.
12. Препарат следует хранить в местах, недоступных для детей.
Наиболее распространённый и простой анализ на содержание соматических клеток в молоке – это тест, основанный на визуальном определении вязкости и окрашивания молока.
Как известно, количество соматических клеток при мастите у коров возрастает, и это количество прямо пропорционально степени развития заболевания у животного. Если клинический мастит обычно можно диагностировать по внешним признакам, то диагностика субклинического мастита у коров бывает затруднена. При этом возрастает риск попадания маститного молока от заболевшей коровы в сборное молоко, отправляемое на молочный завод, что не допускается законодательством.
Для того, чтобы оперативно определить скрытый мастит у коров, очень удобно использовать экспресс-тесты, которые сделаны по принципу Калифорнийского теста на мастит. Такая диагностика, основанная на определении уровня соматических клеток, не требует специального оборудования, её легко делать прямо на ферме, не отходя от коровы. Для проведения теста достаточно иметь под рукой сам реактив и специальную диагностическую пластину с четырьмя чашками для молока из каждой доли вымени. Можно использовать и любые другие емкости при условии, что они будут четко маркированы во избежание перепутывания полученных результатов.
Преимуществами экспресс-тестов по типу Калифорнийского на мастит у коров являются:
- Простота в использовании (любой ветеринарный специалист сможет провести такой тест);
- Достоверность (надежность данных тестов на мастит коров подтверждена длительным практическим использованием);
- Скорость (выявление субклинического и клинического мастита за секунды);
- Экономичность (более дешевые по сравнению с другими методами определения уровня соматических клеток).
Когда обычно используют тесты на мастит в ветеринарной практике? Т есты на мастит, работающие по принципу Калифорнийского мастит-теста , рекомендуется применять в следующих случаях :
- когда у коровы есть подозрение на мастит,
- после лечения животного для оценки его результата,
- перед запуском примерно за две недели,
- для контроля вымени после отела,
- перед переводом животного из группы растёла в основное стадо,
- перед покупкой или продажей коровы,
- для быстрого контроля сборного молока.
Также на фермах с помощью теста проводится периодический контроль для профилактики мастита всех коров через определенный промежуток времени, например, раз в месяц, или чаще в условиях повышенного риска возникновения мастита .
Что входит в состав реагентов на мастит у коров? В состав тестов типа Калифорнийского входят реагенты для лизиса клеток поверхностно-активные вещества (ПАВ) (поверхностно-активные сульфонаты, например, натрий алкансульфат, л аурилсульфат натрия и др.) и индикатор рН, который меняет цвет в зависимости от изменения реакции молока. Тест действует следующим образом: ПАВ разрушают мембраны соматических клеток, что приводит к выделению ДНК из ядер и повышению вязкости молока. Жидкая структура маститного молока становится гелеобразной при добавлении реактива. И чем плотнее будет гель, тем больше соматических клеток содержится в молоке. В то же самое время изменяется и цвет аналита благодаря присутствию в составе диагностического раствора индикатора рН. Данный индикатор срабатывает, если рН молока увеличивается , как это бывает при выраженном мастите у коров. Таким образом, тест основан на изменении сразу двух параметров, что повышает достоверность получаемых результатов.
Что же именно позволяют выявить экспресс-тесты на мастит? Нужно отметить , что тест ы типа Калифорнийского не позволяют определить точное количество соматических клеток , а лишь их приблизительное число . Это вполне нормально для тестов, основанных на визуальной оценке, которые дают представление об интервале измеряемых величин, а не об их точных значениях. Также важно обратить внимание, что тест ы типа Калифорнийского не позволяют судить о том, какой патоген стал причиной возникновения воспалительных процессов в вымени животного, а определяют лишь результат развития воспалительной реакции в виде роста числа клеток иммунной системы животного.
Закономерен вопрос – какова чувствительность экспресс-тестов на мастит у коров ? Несмотря н а некоторую субъективность теста на мастит коров , он достаточно точный и чувствительный. Однако у мастит- тестов от различных производителей чувствительность может отличаться, что связано с природой и качеством реагентов , использованных при производстве. Визуально можно увидеть реакцию (образование нитевидных сгустков) при содержании соматических клеток начиная от 100 тыс. — 200 тыс. и более в зависимости от конкретного теста на мастит . Очень важно выбирать мастит- тесты с наибольшей чувствительностью, чтобы не пропустить начинающийся мастит у коровы и как можно раньше взять такое животное на контроль. Ниже приведена таблица (Таблица 1) – сравнение чувствительности тестов на соматические клетки разных производителей.
Таблица 1. C равнение чувствительности тестов на соматические клетки разных производителей.
Название теста и производитель
Негативная реакция (мастит отсутствует), концентрация соматических клеток, тысяч кл/мл
Следовая реакция (мастит под вопросом, за животным нужно понаблюдать), концентрация соматических клеток, тысяч кл/мл