НАИМЕНОВАНИЕ ТЕСТ-СИСТЕМ
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ
НОМЕР ПО
КАТАЛОГУ
КОЛИЧЕСТВО
АНАЛИЗОВ
ДС-ИФА-АНТИ-ВИЧ-УНИФ
Тест-система иммуноферментная для выявления антител к вирусам иммунодефицита человека l и ll типов в сыворотке и плазме крови человека.
Суммарное время инкубаций – 2 ч.
Срок годности – 12 мес.
Подходит для ручной постановки и постановки на автоматических анализаторах.
I — 155
I — 150
I — 15 3
ДС-ИФА-ВИЧ-АГ-СКРИН
Тест-система иммуноферментная для выявления (подтверждения) антигена ВИЧ-1 (р 24) в сыворотке и плазме крови человека. Чувствительность – 0,5 пг/мл.
Суммарное время инкубаций – 1 ч 55 мин. (шейкер).
Срок годности – 12 мес.
Подходит для ручной постановки и постановки на автоматических анализаторах.
ДС-ИФА-ВИЧ-АГАТ-СКРИН
Тест-система иммуноферментная для одновременного выявления антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, ВИЧ-1 группы О и антигена ВИЧ-1 (р24) в сыворотке и плазме крови человека.
Чувствительность по р24 – 10 пг/мл.
Суммарное время инкубаций – 1 ч 25 мин. (шейкер),1 ч 50 мин. (термостат).
Срок годности – 12 мес.
Подходит для ручной постановки и постановки на автоматических анализаторах.
I — 1656
I — 1652
I — 1654
Тест-система иммуноферментная для идентификации суммарных антител к отдельным белкам ВИЧ-1 – gp 41 env , gp 120 env , p 31 pol , ВИЧ-1 группы О gp 41 env , ВИЧ-2 gp 36 env и выявления антигена ВИЧ-1 (р24) в сыворотке и плазме крови человека. Чувствительность по р24 – 5 пг/мл. Одностадийный вариант.
Суммарное время инкубаций – 1 ч 25 мин. (шейкер), 2 ч 20 мин. (термостат).
Срок годности – 18 мес.
I — 751
Тест-система иммуноферментная для одновременного выявления антител к вирусу иммунодефицита человека 1 и 2 типов (ВИЧ-1 и ВИЧ-2), ВИЧ-1 группы О и антигена ВИЧ-1 (р-24) в сыворотке (плазме) крови человека.
Чувствительность по p 24 – 5 пг/мл.
Суммарное время инкубаций – 1 ч 35 мин.
Срок годности – 18 мес.
Подходит для ручной постановки и постановки на автоматических анализаторах.
I — 2655
I — 2652
I — 2654
НАИМЕНОВАНИЕ ТЕСТ-СИСТЕМ
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ
НОМЕР ПО
КАТАЛОГУ
КОЛИЧЕСТВО
АНАЛИЗОВ
ЦЕНА за
1 набор
с НДС (руб.)
ДС-ИФА-АНТИ-ВИЧ-УНИФ
Тест-система иммуноферментная для выявления антител к вирусам иммунодефицита человека l и ll типов в сыворотке и плазме крови человека.
Суммарное время инкубаций – 2 ч.
Срок годности – 12 мес.
Подходит для ручной постановки и постановки на автоматических анализаторах.
I – 155
I – 150
I – 15 3
ДС-ИФА-ВИЧ-АГ-СКРИН
Тест-система иммуноферментная для выявления (подтверждения) антигена ВИЧ-1 (р 24) в сыворотке и плазме крови человека. Чувствительность – 0,5 пг/мл.
Суммарное время инкубаций – 1 ч 55 мин. (шейкер).
Срок годности – 12 мес.
Подходит для ручной постановки и постановки на автоматических анализаторах.
ДС-ИФА-ВИЧ-АГАТ-СКРИН
Тест-система иммуноферментная для одновременного выявления антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, ВИЧ-1 группы О и антигена ВИЧ-1 (р24) в сыворотке и плазме крови человека.
Чувствительность по р24 – 10 пг/мл.
Суммарное время инкубаций – 1 ч 25 мин. (шейкер),1 ч 50 мин. (термостат).
Срок годности – 12 мес.
Подходит для ручной постановки и постановки на автоматических анализаторах.
I – 1656
I – 1652
I – 1654
ДС-ИФА-ВИЧ-АТ/АГ-СПЕКТР
Тест-система иммуноферментная для идентификации суммарных антител к отдельным белкам ВИЧ-1 – gp 41 env , gp 120 env , p 31 pol , ВИЧ-1 группы О gp 41 env , ВИЧ-2 gp 36 env и выявления антигена ВИЧ-1 (р24) в сыворотке и плазме крови человека. Чувствительность по р24 – 5 пг/мл. Одностадийный вариант.
Суммарное время инкубаций – 1 ч 25 мин. (шейкер), 2 ч 20 мин. (термостат).
Е. Н. БАРАНОВА, И. Н. ШАРИПОВА, Е. Н. КУДРЯВЦЕВА, О. А. ЛОБАНОВА, В. Ф. ПУЗЫРЕВ,
С. А. РЯБИНИНА, А. Н. БУРКОВ, А. П. ОБРЯДИНА, Т. И. УЛАНОВА
Московский областной научно-исследовательский клинический институт
Серологическая диагностика ВИЧ инфекции в России строится на выявлении суммарного спектра антител против антигенов ВИЧ c помощью иммуноферментных тест-систем
3 поколения, либо на одновременном выявлении антител и вирусного антигена р24 тест-системами 4 поколения. Для верификации результатов ИФА в России используют метод иммунного блоттинга (ИБ), который позволяет выявлять антитела к отдельным белкам ВИЧ.
Одной из основных проблем лабораторной диагностики ВИЧ инфекции является
-
Ранняя и поздняя стадии ВИЧ инфекции, когда уровень антител низкий, в ИБ выявляются антитела только IgG класса, а подтверждение наличия антигена р24 не предусмотрено; Кросс-реактивность между ВИЧ-1 и ВИЧ-2; Кросс-реактивность c другими антигенами, не связанными с ВИЧ
для раздельного выявления антител к отдельным белкам ВИЧ 1 и 2 типов и антигена
р24 в анализируемом образце.
Результаты и обсуждение. Действующим началом разработанной тест-системы являются: рекомбинантные антигены, аналогичные структурным белкам ВИЧ-1 – gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), gp41 (env) ВИЧ-1 и ВИЧ-1 группы О, ВИЧ-2 – gp36 (env); моноклональные антитела мыши к антигену ВИЧ-1 р24 gag, сорбированные раздельно на стрипах
полистиролового разборного планшета; конъюгаты – рекомбинантные антигены и
моноклональные антитела, меченые биотином и стрептавидин, меченый пероксидазой.
поэтапным внесением конъюгатов, что позволило значительно увеличить чувствительность анализа за счет процесса амплификации сигнала при взаимодействии биотина со стрептавидин-пероксидазой. Разработана система визуальной оценки внесения всех компонентов и образцов. Отсутствие этапа промывания планшета между двумя стадиями позволило сделать постановку анализа более удобной и сократить общее время анализа до 1 ч 25 мин.
(2 образца) при первичном тестировании в ИБ. При исследовании в динамике эти образцы продемонстрировали в ИБ позитивный результат.
Труды конференции «Эпидемиология, диагностика и профилактика вирусных гепатитов. Современное состояние, С.-Петербург, 5-6 октября 2006.- С.
Аннотация научной статьи по наукам о здоровье, автор научной работы — Шарипова Ирина Николаевна, Ходак Н. М., Пузырев В. Ф., Бурков А. Н., Уланова Т. И.
Похожие темы научных работ по наукам о здоровье , автор научной работы — Шарипова Ирина Николаевна, Ходак Н. М., Пузырев В. Ф., Бурков А. Н., Уланова Т. И.
The comparative study of specificity of test-systems in diagnostic of HIV-ifnection on categories of samples of blood serum of pregnant women
Шарипова И.Н., Ходак Н.М., Пузырев В.Ф., Бурков А.Н., Уланова Т.И.
сравнительное исследование специфичности тест-систем для диагностики вич-инфекции на категории образцов сывороток Крови беременных женщин
Ключевые слова: ВИЧ-инфекция; специфичность; образцы сывороток крови беременных женщин. Sharipova I.N., KhodakN.M., Puzirev V.F., Burkov A.N., Ulanova T.I.
THE COMPARATIVE STUDY OF SPECIFICITY OF TEST-SYSTEMS IN DIAGNOSTIC OF HIV-INFECTION ON CATEGORIES OF SAMPLES OF BLOOD SERUM OF PREGNANT WOMEN
The R&D production complex «Diagnostic systems’, Nizhnii Novgorod, Russia
Keywords: HIV-infection; specificity; sample; blood serum’ pregnant woman.
В нормативных документах ВОЗ [1] и Евросоюза [2] указаны пределы минимально допустимого уровня специфичности для скрининговых тестов на основе иммуноферментного анализа (ИФА): > 98 и 99,5% соответственно. В настоящее время использование ИФА-тест-систем для одновременного выявления специфических антител (АТ) к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, а также антигена р24 ВИЧ-1 является стандартным методом лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции. Достаточно хорошо известен перечень факторов, которые не связаны с ВИЧ-инфекцией, но могут способствовать возникновению ложноположительных реакций (ЛПР) при ИФА-диагностике [3]. Наиболее значимые причины ЛПР в ИФА-диагностике ВИЧ-инфекции приведены в табл. 1.
Однако это не означает, что все вышеперечисленные факторы непременно приводят к ЛПР. Многое зависит от конструктивных особенностей используемого теста, времени воздействия инородных антигенов, в том числе возбудителей
Шарипова Ирина Николаевна, нач. участка отработки технологии диагностикумов
Адрес: 603093, Нижний Новгород, ул. Яблоневая, 22, а/я 69 E-mail: sharipovain@npods.ru
инфекционных заболеваний, на человека. Чем шире набор АТ в организме человека, тем выше вероятность наличия нескольких перекрестно реагирующих АТ. Особенно часто это наблюдают у потребителей инъекционных наркотиков. Их организм просто перегружен антигенами.
Согласно приказу Минздрава РФ от 19.12.03 № 606 [4] и приказу Минздравсоцразвития РФ от 30.05.05 № 375 [5], тестирование на ВИЧ включено в перечень рутинных лабораторных анализов, рекомендованных для обследования беременных женщин. Сыворотки крови беременных в лабораториях традиционно считают сложными, при их исследовании на ВИЧ высока вероятность получения ЛПР. Это связывают с тем, что во время гестации в крови женщин изменяются микроэлементный состав, концентрация цитокинов и гормонов, а кроме того, формируются специфические белки беременности 6. Нередко ложноположительные результаты на ВИЧ при беременности отмечают у женщин с наличием в анамнезе инфекционных, аутоиммунных и хронических соматических заболеваний. Для того чтобы выяснить, является ли проблема получения ЛПР проблемой только для какой-то конкретной тест-системы или она присуща всем тестам на ВИЧ, провели исследование образцов сывороток крови беременных с использованием трех тест-систем четвертого поколения для диагностики ВИЧ-инфекции.
ИММУНОЛОГИЯ Таблица 1
Перечень факторов, являющихся причинами лПр ИФА-тестов для диагностики ВИЧ-инфекции
1. Факторы, ассоциированные с другими инфекциями
Респираторные инфекции верхних дыхательных путей Острые вирусные инфекции, в том числе вызванные ДНК-содержащими
Лепра IgM к вирусу гепатита А
Туберкулез IgM к ядерному антигену вируса гепатита В
Инфекция, вызванная Mycobacterium avium Ку-лихорадка (с сопутствующим гепатитом)
Инфекция, вызванная вирусом простого герпеса 1-го и 2-го Инфекции, вызванные другими ретровирусами типов (ВПГ-1, ВПГ-2)
Грипп Инфекция, вызванная вирусом Эпштейна-Барр
Малярия Висцеральный лейшманиоз
Недавно перенесенная вирусная инфекция
2. Факторы, связанные с иммунизацией
Вакцинация против гриппа Пассивная иммунизация: введение иммуноглобулинов
Вакцинация против гепатита В Использование препаратов иммуноглобулинов, изготовленных до 1985 г.
Вакцинация против столбняка
3. Факторы, связанные с системными аутоиммунными заболеваниями и реакциями
Аутоиммунные заболевания: системная красная волчанка, Высокий уровень циркулирующих иммунных комплексов системная склеродермия, дерматополиомиозит
4. Факторы, связанные с присутствием АТ в крови Антикарбогидратные АТ АТ к гладкой мышечной ткани
Нормальные (естественные) АТ АТ к париетальным клеткам желудка
Гипергаммаглобулинемия Нормальные рибонуклеопротеины человека
Антилимфоцитарные АТ АТ HLA (к антигенам лейкоцитов классов I и II)
Антимитохондриальные АТ АТ к антигенам Т-клеточных лейкоцитов
Антинуклеарные АТ АТ с высокой способностью связываться с полистиролом (используют в
Антимикросомальные АТ АТ к коллагену (определяют у мужчин, практикующих секс с мужчинами,
у больных гемофилией и у больных лепрой)
5. Факторы, связанные с потенциально кросс-реактивными реакциями Беременность (особенно у неоднократно рожавших женщин) ЛПР в других тестах, включая RPR-тест на сифилис Гемолизированные образцы сыворотки крови Кросс-реактивность неясного генеза у здоровых людей Образцы сыворотки крови с гиперлипемией Загрязнение фильтровальной бумаги веществами белковой природы Образцы сыворотки крови, подвергшиеся тепловой обработке Анальный секс
6. Факторы, связанные с гемотрансфузией и трансплантацией органов
Гемотрансфузии, особенно множественные Терапия препаратами а-интерферона пациентов, находящихся на гемодиализе
Трансплантация органов (в том числе почек) Гемодиализ/почечная недостаточность
7. Факторы, связанные с неинфекционными болезнями и новообразованиями Первичный склерозирующий холангит Гемофилия
Первичный билиарный цирроз Злокачественные новообразования лимфоидной, кроветворной и род-
ственных им тканей/лимфома
Алкогольный гепатит/алкогольное поражение печени Злокачественные новообразования (рак)
Гипербилирубинемия Миеломная болезнь
Синдром Стивенса-Джонсона Рассеянный склероз
Цель настоящей работы — сравнительная оценка специфичности ИФА-тест-систем для диагностики ВИЧ-инфекции при исследовании образцов сывороток крови беременных женщин.
Материалы и методы. Исследование образцов сывороток крови беременных женщин проводили с использованием
Характеристика ИФА-тест-систем, используемых в исследовании
Тест Формат теста Набор АТ и антигенов Чувствительность при выявлении антигена р24 ВИЧ-1 Время проведения анализа
«ДС-ИФА-ВИЧ-АГАТ-СКРИН» Одноэтапный сандвич ИФА Моноклональные АТ к р24 ВИЧ-1, Rec-gp160, gp41 группы О, р31, gp36 10 пг/мл (0,5 МЕ/ мл) Термошейкер — 1 ч 25 мин; термостат — 1 ч 50 мин
«Genscreen Ultra HIV Ag-Ab» Двухэтапный сандвич ИФА Моноклональные АТ к р24 ВИЧ-1, Rec-gp160, peptide HIV1 группы O, peptide HIV-2 25 пг/мл Термостат — 2 ч
«КомбиБест ВИЧ-1,2 АГ/АТ» То же Моноклональные АТ к р24 ВИЧ-1, rec-HIV-1,2 10 пг/мл Термошейкер — 1 ч 35 мин; термостат — 2 ч
«New Lav Blot I» Непрямой ИФА ВИЧ-1-вирусные белки — 3 ч 10 мин
«ДС-ИФА-ВИЧ-АГ-СКРИН» Одноэтапный сандвич ИФА Моноклональные АТ к р24 ВИЧ-1 0,5 пг/мл (0,025 МЕ/мл) Термошейкер — 1 ч 55 мин
результаты исследования образцов сывороток крови беременных
различных лечебно-профилактических учреждений Нижнего Новгорода.
Результаты и обсуждение. При первичном исследовании 440 образцов сывороток крови беременных во всех трех тест-системах выявили первично позитивные образцы: 15 образцов
Номер образца «ДС-ИФА-ВИЧ- АГАТ-СКРИН» «КомбиБест ВИЧ-1,2 AГ/AТ» «Genscreen Ultra HIV Ag-Ab» «New Lav Blot I» Результат блота
коэффициент позитивности (КП)
16 1,3 0,8 0,92 — Отрицательный
44 21,6 25,4 11,0 Полный блот Положительный
52 6,3 0,4 0,27 — Отрицательный
98 20,7 24,8 11,4 Полный блот Положительный
99 0,05 0,22 5,3 р34/31 Неопределенный
101 9,4 0,18 0,4 — Отрицательный
115 0,08 0,14 1,02 — «
130 19,6 24,8 11,4 Полный блот Положительный
131 0,13 2,8 3,8 р55 Неопределенный
136 0,1 1,1 2,5 — Отрицательный
181 14,3 26,3 11,4 Полный блот Положительный
233 12,0 24,1 11,9 » » «
244 1,56 0,29 0,32 — Отрицательный
320 15,6 21,6 12,2 Полный блот Положительный
370 6,0 0,32 0,28 — Отрицательный
412 15,0 22,7 11,0 Полный блот Положительный
416 0,13 1,2 1,12 — Отрицательный
Выводы. 1. При исследовании образцов сывороток крови беременных в тест-системах, выявляющих маркеры ВИЧ-инфекции, специфичность тестов разных производителей совпадает и составляет 98,64% (95% доверительный интервал 97,06-99,37).
2. Результаты, полученные при исследовании трех тестов на ВИЧ, показали, что ЛПР присущи всем тест-системам, при этом спектр ЛП-образцов может различаться. Следует отметить, что не существует ИФА со 100% специфичностью.
3. Предложен альтернативный подход к решению вопроса ЛПР на ВИЧ при скрининговом исследовании образцов сывороток крови беременных женщин — последовательное использование двух тест-систем четвертого поколения с различным форматом постановки реакции.
1. World Health Organization. HIV assays operational characteristics: HIV rapid diagnostic tests (detection of HIV-1/2 antibodies): report 17; 2013.
2. Commission decision of 3 February 2009 amending Decision 2002/364/ EC on common technical specifications for in vitro-diagnostic medical devices. Off Jof theEuropean Union. 2009; 39: 34-49.
3. Johnson C. Whose antibodies are they anyway? Continuum. 1996; Sept./Oct.
6. Никулина Д.М. Минорный белок сыворотки крови — связанный с беременностью альфа2-гликопротеин: теоретические и практические аспекты: Дис. Москва; 2008.
7. Спиридонова Н.В., Балтер Р.Б. Прогнозирование развития гесто-за с помощью многомерного математического анализа. Вестник СамГУ- Естественнонаучная серия. 2007; 2 (52): 264-76.
8. Чистякова Г.Н., Газиева И.А., Ремизова И.И., Черданцева Г.А., Черешнев В.А. Оценка цитокинового профиля при физиологической и нормально протекающей беременности. Цитокины и воспаление. 2007; 6 (1): 3-8.
9. Chao T.T., Sheffield J.S., Wendel G.D. Jr., Ansari M.Q., McIntire D.D., Roberts S. W. Risk factors associated with false positive HIV test results in a low-risk urban obstetric population. J. Pregnancy. 2012; 2012: 841979.
10. Doran T.I., Parra E. False-positive and indeterminate human immunodeficiency virus test results in pregnant women. Arch. Fam. Med. 2000; 9(9): 924-9.
11. Wesolowski L.G., Delaney K.P., Lampe M.A., Nesheim S.R. False-positive human immunodeficiency virus enzyme immunoassay results in pregnant women. PLoS One. 2011; Jan 27; 6(1): e16538.
12. Евстигнеев И.В. Лабораторные методы диагностики острой, ранней и текущей ВИЧ-инфекции. Клиническая иммунология. Аллергология. Инфектология. 2012; 4: 34-40.
1. World Health Organization. HIV assays operational characteristics: HIV rapid diagnostic tests (detection of HIV-1/2 antibodies): report 17; 2013.
2. Commission decision of 3 February 2009 amending Decision 2002/364/EC on common technical specifications for in vitro-diagnostic medical devices. Off J of the European Union. 2009; 39: 34-49.
3. Johnson C. Whose antibodies are they anyway? Continuum. 1996; Sept./Oct.