Онкогенные вирусы представляют собой группу неродственных вирусов (табл. 22.1), способных вызывать персистирующую инфекцию в клетках организма человека, приводящую к их трансформации (иммортализации). Трансформированные клетки приобретают новые свойства — высокую скорость размножения, способность к бесконтрольному неограниченному делению, утрачивают чувствительность к сигналам, ингибирующим размножение, включая контактное ингибирование. Происходит изменение их морфологии и метаболизма. Появление трансформиро-
22.1. Онкогенные вирусы и вирус иммунодефицита человека |
СЕМЕЙСТВО Herpesviridae ПОДСЕМЕЙСТВО Gammaherpesvirinae РОД Lymphocryptovirus вирус Эпштейна—Барр (EBV) |
РОД Rhadinovirus герпесвирус человека 8-го типа Саркома Капоши (HHV-S) СЕМЕЙСТВО Hepadnaviridae вирус гепатита В (HBV) СЕМЕЙСТВО Retroviridae РОД Deltaretrovirus Т-лимфотропные вирусы человека типов 1, 2, 5 (HTLV-1, HTLV-2, HTLV-5) |
ванных клеток в организме может в конечном итоге привести к возникновению злокачественного новообразования. Папилломавирусы человека (HPV) — просто устроенные ДНК-содержащие вирусы с изометрическим типом симметрии капсида. К настоящему моменту известно более 70 типов HPV, которые дифференцируют на основании первичной последовательности ДНК. HPV поражают эпителиоциты кожи и сли- |
Таблица (ВИЧ)
HPV-16, HPV-18 и др.
вирусы иммунодефицита человека (ВИЧ) 1-го, 2-го типа (HIV-l, HIV-2)
Доброкачественные папилломы различных локализаций, опухоли кожи и слизистых оболочек верхних дыхательных путей, гениталий (рак шейки матки)
Поражения почек (см. также главу 21)
Мультифокальная прогрессирующая лейкоэнцефалопатия (см. также главу 19)
Т-клеточные лейкозы/лимфо-мы, эндемическая лимфома Беркитта, карцинома носоглотки
Острый Т-клеточный лимфо-цитарный лейкоз/лимфома, тропический спастический паралич (см. также главу 19)
ВИЧ-инфекция/Синдром приобретенного иммунодефицита (ВИЧ/СПИД)
зистых оболочек, преимущественно респираторного и гени-тального Тракта. ЯРКявляются возбудителями доброкачественных разрастаний — папиллом (бородавок) ладоней и ступней (чаще HPV типов 1, 2, 3, 4), ротовой полости и гортани (чаще HPV6 и 11-го типов), наружных половых органов — condyloma acuminatum (HPV 6, 11, 42—44-го типов). С ЯРК-инфекцией также связывают развитие ряда злокачественных новообразований: шюскоклеточного рака кожи, кератокарциномы, мела-номы — в клетках этих опухолей в некоторых случаях удается обнаружить HPV типов 37, 38, 41 и 48, интраэпителиальные неоплазии генитального тракта (шейки матки, вульвы, полового члена) ассоциированы преимущественно с ЯРКтипов 6, 11, 16 и 18. Наиболее высоко онкогенными являются HPVтипов 16 и 18. Эти вирусы в 90—100 % случаев обнаруживаются в опухолевых клетках при карциноме шейки матки и выявляются при раке прямой кишки и карциноме носоглотки и гортани.
Полиомавирусы вызывают опухоли у лабораторных животных. У человека представители этого рода — вирусы ВК (BKV) и JC (JCV) — вызывают пожизненную бессимптомную латентную персистирующую инфекцию. Заболевания развиваются только на фоне иммунодефицита. BKV является возбудителем геморрагического цистита (см. главу 21). JCV вызывает развитие медленной инфекции — мультифокальной лейкоэнцефало-патии (см. главу 19).
Вирус Эпштейна—Барр является возбудителем инфекционного мононуклеоза (см. главу 21) и вызывает пожизненную бессимптомную латентную инфекцию, персистируя в незрелых В-лимфоцитах. Латентная инфекция сопровождается трансформацией В-лимфоцитов. При недостаточном защитном клеточном иммунитете бесконтрольная пролиферация трансформированных В-лимфоцитов может привести к развитию злокачественной опухоли — лимфомы. Специальная лабораторная диагностика не проводится.
Герпесвирус человека 8-го типа (ЯЯК-8) вызывает пожизненную бессимптомную латентную инфекцию. С его реактивацией на фоне иммунодефицита (СПИД, возраст старше 60 лет) связывают развитие сосудистой опухоли — ангиосар-комы Капоши. Специальная лабораторная диагностика не проводится.
Вирус гепатита В является возбудителем вирусного гепатита В (см. главу 20). В случае хронической активной формы заболевания через 10—35 лет может развиться первичный рак печени. Более чем в 80 % случаев в опухолевых клетках обнаруживают дефектные провирусы. Специальная лабораторная диагностика не проводится.
Среди онкогенных ретровирусов связь с опухолями человека установлена только для Т-лимфотропного вируса человека 1-го типа — HTLV-1. Вирус вызывает пожизненную бессимптомную
латентную инфекцию, персистируя в Т-лимфоцитах; хелперах (CD4 + ). Заболевания — острый Т-клеточный лимфо;цитарный лейкоз/лимфома или тропический спастический йаралич — развивается менее чем в 5 % случаев и имеет длительный инкубационный период.
Вирусы иммунодефицита человека 1-го и 2-го типа (ВИЧ-1 и ВИЧ-2) являются возбудителями медленной инфекции с длительным инкубационным (латентным) периодом от 3 до 10 лет и более. Первичная инфекция может протекать бессимптомно или с неспецифическими гриппоподобными проявлениями. После длительного латентного периода у ВИЧ-инфицированных лиц развивается синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД), который характеризуется снижением содержания в крови CD4 + Т-лимфоцитов (менее 500/мм 3 ) и разнообразными клиническими проявлениями, включая СПИД-ассоциированные оппортунистические инфекции и опухоли. Для предотвращения распространения и своевременного начала лечения первостепенное значение имеет ранняя диагностика ВИЧ-инфекции. В общей стратегии лабораторного обследования с целью выявления ВИЧ/СПИД существуют следующие направления: обследование больных с клинической картиной СПИД или СПИД-ассоциированных заболеваний (оппортунистических инфекций и опухолей); обследование здоровых лиц, контактировавших с больными (половые контакты, мать—ребенок и др.); обследование беременных, рожениц и лиц при плановой госпитализации; анонимное обследование всех желающих. Строго обязательным является обследование доноров крови, спермы, костного мозга и других с целью выявления потенциальных источников инфекции и предотвращения ят-рогенного заражения.
Тема 22.1. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ИНФЕКЦИЙ, ВЫЗВАННЫХ ОНКОГЕННЫМИ ВИРУСАМИ ЧЕЛОВЕКА И ВИРУСАМИ ИММУНОДЕФИЦИТА ЧЕЛОВЕКА
1. Биологические свойства онкогенных вирусов. Вирусные и клеточные онкогены и антионкогены. Роль онкогенных вирусов в патогенезе злокачественных новообразований человека.
2. Биологические свойства ВИЧ. Экология ВИЧ и эпидемиология ВИЧ-инфекции, группы риска. Патогенез, диагностика, принципы профилактики и лечения ВИЧ/СПИД. СПИД-ассоциированные оппортунистические инфекции.
1. Ознакомиться с бланками направлений на исследование в вирусологическую лабораторию.
2. Указать материал для диагностики ВИЧ-инфекции.
3. Ознакомиться с тест-системами для серодиагностики ВИЧ-инфекции.
4. Оценить результаты серодиагностики ВИЧ-инфекции методом ИФА и наметить план дальнейшего обследования.
• Микробиологическая диагностика инфекций, вызванных
HPV
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: мазок-соскоб или биоптат из пораженного участка кожи или слизистой оболочки.
Цитологический метод — обнаружение измененных клеток с признаками ЦПД (коилоциты).
Вирусоскопический метод — обнаружение зрелых вирусных частиц в зараженных клетках. Этот метод позволяет обнаружить вирусы только в случае их репродукции. В опухолевых клетках присутствуют дефектные вирусы, не способные к репродукции.
Вирусологический метод — не применяют в связи со сложностью культивирования вируса.
Экспресс-методы диагностики: иммунохимические и молеку-лярно-биологические методы. Иммунохимические исследования. Обнаружение вирусных антигенов в зараженных клетках методом ИФ.
Молекулярно-биологические исследования. Обнаружение вирусных ДНК в зараженных клетках — метод ДНК-зондов (ДНК-гибридизация in situ), ПЦР. Эти методы позволяют диагностировать латентную инфекцию и присутствие дефектных вирусов.
Серодиагностика. С целью диагностики ЯРК-инфекции выявляют антитела к белкам капсида и вирусным онкогенам.
• Микробиологическая диагностика инфекций, вызванных BKV
и JCV (см. главу 21 и главу 19 соответственно)
• Диагностика инфекций, вызванных HTLV
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: кровь.
Серодиагностика — обнаружение антител к вирусным белкам — применяют для выявления вирусоносительства и лабораторной диагностики тропического спастического паралича (см. также главу 19).
• Микробиологическая диагностика ВИЧ-инфекции
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: кровь, лейкрциты периферической крови, пунктат лимфатических узлов и костного мозга. Вирус также может быть обнаружен в отделяемом слизистых оболочек генитального тракта, сперме, слюне, слезной жидкости, грудном молоке, спинномозговой жидкости, в трупном материале.
Вирусологический метод(схема 22.1.1). Выделение вируса из крови и лейкоцитов в связи со сложностью культивирования в клинической практике используется редко. Основным показанием к применению является раннее обнаружение вируса у новорожденных от ВИЧ-инфицированных матерей. Вирус выделяют путем совместного культивирования мононуклеарных лейкоцитов периферической крови пациента с лейкоцитами здоровых доноров в присутствии IL-2 для стимуляции роста Т-лимфоцитов. ЦПД проявляется образованием синцития и лизисом зараженных клеток. Метод позволяет выявить латентную инфекцию. О присутствии вируса судят по результатам определения специфических антигенов ВИЧ (р24, обратной транскриптазы) в культуральной среде и зараженных клетках. Культивирование ВИЧ требует соблюдения специальных условий безопасности при работе.
Экспресс-методы диагностики: иммунохимические и молеку-лярно-биологические методы.Иммунохимические исследования. Обнаружение вирусных антигенов (р24) в крови и лимфоцитах с помощью ИФА. Следует учитывать, что р24 в достаточном для выявления количестве присутствует в крови только при первичной инфекции и на поздних стадиях заболевания.
Молекулярно-биологические исследования. Обнаружение РНК вирусов в крови методом RT-ПЦР. Метод основан на преобразовании вирусной РНК в комплементарную ДНК (кДНК) с использованием фермента обратной транскриптазы (RT) и амплификации полученной кДНК методом ПЦР — применяется для определения уровня вирусемии. Чувствительность метода позволяет обнаруживать вирус в малых концентрациях.
Серодиагностика.Обнаружение антител к вирусным антигенам (поверхностным белкам gpl20) — методы ИФА — применяют для массового обследования. В случае положительного результата с целью верификации осуществляют поиск антител к индивидуальным вирусным белкам методом иммуноблоттин-га, непрямой ИФ и другими методами.
Метод иммуноблоттинга («вестерн-блот») — тестирование сыворотки на наличие антител против отдельных вирусных
антигенов сердцевины и поверхностной оболочки ВИЧ.Вирусные белки с помощью электрофореза в вертикальном блоке полиакриламидного геля разделяют по молекулярной массе и переносят на нитроцеллюлозную мембрану, где антитела сыворотки реагируют с индивидуальными вирусными белками. Образующиеся иммунные комплексы выявляются авторадио-графически или с помощью ИФА.
Для косвенного подтверждения диагноза СПИД могут быть использованы методы оценки иммунного статуса: определение общего количества лимфоцитов, Т-лимфоцитов, соотношения CD4 + /CD8 + Т-лимфоцитов, количества натуральных киллеров, уровней сывороточных иммуноглобулинов. Для СПИД характерно развитие Т-клеточного дефицита: снижение количества Т-лимфоцитов, преимущественно Т-хелперов CD4 + (менее 500/мм 3 ), снижение уровня показателя CD4 + /CD8 + ниже 1,0; уменьшение количества натуральных киллеров; умеренная поликлональная гипергаммаглобулинемия с увеличением содержания IgG.
• Диагностические, профилактические и лечебные препараты
Тест-системыдля диагностики ВИЧ/СПИД методом ПЦР.
Тест-системыдля серодиагностики ВИЧ/СПИД методом ИФА.
Тест-системыдля диагностики папилломавирусной инфекции методом ПЦР.
Ингибиторы обратной транскриптазы:азидотимидин (AZT), ди-дезоксиинозин (DDI), дидезоксицитидин (DDC), невирапин и др.
Ингибиторы протеазы:саквинавир, ритонавир, индинавир, нелфинавир и др.
Препараты для иммунотерапии:интерферон человеческий лейкоцитарный; интерферон рекомбинантный.
Глава 23 |
Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:
Синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД, AIDS по-английски), вызываемый вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), является смертельной болезнью, средств для лечения которой в настоящее время не существует.
ВИЧ и СПИД не синонимы. СПИД – понятие более широкое и означает дефицит иммунитета. Такое состояние может возникнуть в результате самых различных причин: при хронических истощающих заболеваниях, воздействии лучевой энергии, у детей с дефектами иммунной системы и у больных старческого возраста с инволюцией иммунной защиты, некоторых медикаментозных и гормональных препаратов. В настоящее время название СПИД применяется для обозначения только одной из стадий ВИЧ-инфекции, а именно манифестной ее стадии.
ВИЧ-инфекция — новое инфекционное заболевание, называвшееся до открытия ее возбудителя как синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД). ВИЧ-инфекция — прогрессирующее антропонозное инфекционное заболевание, с кровоконтактным механизмом заражения, характеризующееся специфическим поражением иммунной системы с развитием тяжелого иммунодефицита, который проявляется вторичными инфекциями, злокачественными новообразованиями и аутоиммунными процессами.