Частенько вижу в приходящих результатах анализов биоматериалов, в графе «Референсные значения» упоминания о некоей «Серой зоне». Что это такое?
я догадываюсь, что это может быть неоднозначный результат — норма в разных источниках варьирует, и сложно определиться, например, сколько лейкоцитов в крови норма, а где уже отклонение. вот между этими понятиями и лежит, видимо, серая зона — спорный результат
Скорее всего, речь идет о тесте на реактивность антител. Специальный индикатор, используемый при анализе, создает очевидную «картинку» на шкале активности. Выражаясь умным языком, на полоску наносятся различные антигены, связанные с инфекционным агентом. Ну, там, краснухи, герпеса и прочих.
Потом на эту полоску наносится ваш биоматериал, вернее — сыворотка из него. И если в сыворотке есть антитела к этим антигенам, они связываются с ними. Лаборант полоску промывает и наносит еще антитела — вторичные. Чтобы связать оставшиеся, после первого исследования материалы.
После последней промывки, на визуальной шкале полоски остаются окрашенные участки, по которым и делается заключение о реактивности антител на ту или иную вирусную инфекцию. А так как шкала не цифровая, а имеет цветовую информативность, то невнятно окрашенные участки ее и называют «серой зоной». То бишь — значение активности антител неясное.
Рекомендуют сдать анализ через некоторое время еще раз. Для статистического убеждения. Но вполне определенно трактуют «серую зону» — как отрицательный результат.
Бесплатная горячая линия юридической помощи
- Главная
- ПРИКАЗ Минздрава РФ от 26.03.2001 N 87 «О СОВЕРШЕНСТВОВАНИИ СЕРОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ СИФИЛИСА»
ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ ДЛЯ СЕРО- И ЛИКВОРОДИАГНОСТИКИ СИФИЛИСА
Лаборатории, в которых осуществляется постановка ИФА, должны быть укомплектованы:
— набором автоматических пипеток (микродозаторов), который включает в себя одноканальные пипетки переменного объема, рассчитанные на дозирование 5-40, 40-200 и 200-1000 мкл жидкости, а также 8-канальные пипетки переменного объема на 5-50 (при использовании тест — систем с рабочим разведением образцов 1:100 и 1:200) и 50-300 мкл;
— набором мерной химической посуды;
— термостатом, рассчитанным на поддержание температуры 37 град. С;
— дистиллятором лабораторным для получения дистиллированной воды;
Результаты ИФА с сывороткой крови и ликвором при использовании всех тест — систем с автоматическим учетом регистрируют на спектрофотометре для планшетов немедленно после постановки реакции с измерением оптической плотности (ОП) раствора субстрата при длине волны 492 нм.
Выведение спектрофотометра на нулевой уровень («бланк») осуществляют по воздуху. Учет результатов реакции проводят согласно методике и цифровым данным, изложенным в инструкции по применению, имеющейся в каждом используемом наборе. При автоматическом учете результатов реакции по величине цифровых показателей ОП в лунках с испытуемыми образцами судят о концентрации специфических антител в исследуемой сыворотке крови и ликворе. В связи с этим данный метод оценки результатов называют количественным. При каждой постановке ИФА рассчитывают критическое значение ОП (ОПкрит.) и «серую зону». «Серой зоной» является интервал от ОПкрит. — 10% до ОПкрит. + 10%. Исследуемый образец учитывают как положительный, если ОП данного образца выше «серой зоны», как сомнительный, если ОП находится в пределах «серой зоны», и как отрицательный, если ОП ниже «серой зоны». Так учитывают результаты во всех тест — системах, кроме тест — системы «ЛюисСкрин». В тест — системе «ЛюисСкрин» исследуемая сыворотка расценивается как положительная, если ее ОП превышает ОП отрицательного контроля не менее, чем в 2 раза.
К сожалению, при учете результатов реакции все ИФА тест — системы невозможно привести к единому стандарту. Один и тот же образец может давать в разных тест — системах совершенно разный уровень окрашивания раствора субстрата. Это зависит от конструкции самой тест — системы, используемого антигена, концентрации конъюгата и др., а также от величины ОПкрит. Поэтому более точной оценкой результатов ИФА является титр противотрепонемных антител каждого положительного образца. С целью определения титра производят последовательные 2-кратные разведения испытуемой сыворотки крови, давшей положительный результат. За титр принимают наибольшее разведение сыворотки, дающее положительный результат. Следовательно, титр является количественным показателем уровня специфических антител в данном образце и степени его позитивности. Но следует учитывать, что повторное исследование сыворотки крови должно осуществляться с той же тест — системой, так как титр антител в одном и том же образце может быть различным при использовании разных тест — систем.
При применении тест — системы с визуальным учетом результатов также рекомендуется определение титров противотрепонемных антител в резко положительных сывороточных образцах (4+).
Отрицательной чертой количественного метода исследования с целью определения титра антител в сыворотке крови и ликворе является его неэкономичность. В связи с этим целесообразно использовать другой критерий для характеристики концентрации антител — коэффициент позитивности (КП), равный отношению оптической плотности, полученной для каждого образца, к критической оптической плотности: КП = ОП/ОПкрит. КП у положительных образцов выше 1,1, сомнительных — находится в интервале от 0,9 до 1,1 и отрицательных — ниже 0,9. Определение КП целесообразно проводить при выяснении динамики выработки антител у пациента в процессе наблюдения за ним после лечения сифилиса, при этом обязательно нужно использовать ту же тест — систему, что и до лечения больного. Эта методика не требует дополнительных финансовых затрат и дает представление об эффективности лечения.
При использовании тест — системы иммуноферментной для качественного выявления антител к возбудителю сифилиса в сыворотке крови человека («АТ-Треп.-ИФТС», г. Ставрополь) возможен только визуальный учет результатов реакции. При резко положительном (4+) результате субстратная смесь имеет темно — коричневый цвет, при положительном (3+) — коричневый цвет, при слабоположительном (2+) — светло — коричневый, при отрицательном (+,-) — светло — бежевый цвет или бесцветна.
Образцы, для которых получен сомнительный результат (соответствующая им ОП находится в пределах «серой зоны» и КП в интервале от 0,9 до 1,1) подлежат повторному анализу. При повторном сомнительном результате рекомендуется анализ с новой порцией крови, взятой через 3-7 дней.