Что такое исследование методом ифа вич инфекций

Иммуноферментный анализ (ИФА) – это способ исследования крови в лаборатории, основанный на поиске специальных клеток – антител к различным заболеваниям. Метод позволяет не только выявить возбудителя, но и установить, на какой стадии находится патологический процесс. Последнее очень важно для прогноза и дальнейшего лечения пациента.

Преимущества и недостатки метода

Среди всех современных методов диагностики ИФА является самым инновационным и технически точным. Его основными преимуществами являются:

1. Способность поиска всех существующих антител к инфекционным заболеваниям в крови пациента.
2. Высокая доступность метода исследования. На сегодняшний день анализы методом ИФА может выполнить любая лаборатория среднего масштаба.
3. Практически 100% специфичность и чувствительность метода.
4. Возможность поиска антител и антигенов, а также установление стадии патологического процесса и отслеживание его динамики, благодаря сравнению количества.

Такое количество преимуществ перед другими анализами полностью затмевает один-единственный недостаток анализа: он способен выявлять антитела, но не самого возбудителя.

Основные термины для оценки анализа

Для того чтобы разобраться в том, какой бывает ИФА-анализ, что это такое и как выполняется, нужно познакомиться с основными терминами, применяемыми специалистами.

Суть и область применения метода

У пациентов зачастую возникает вопрос: ИФА-анализ, что это такое, как выполняется и для чего он нужен? Доступно о методе можно рассказать, описав вкратце его стадии.

Подготовительная стадия. Врач лаборатории использует специальный планшет, в котором 96 лунок. На поверхность каждой лунки нанесен антиген определенного возбудителя.

Стадия 1. Выполняется забор крови, которая затем по капле наносится на лунку. В лунке запускается реакция между антигеном и антителом в крови.

Стадия 2. В лунке полным ходом идет реакция с образованием иммунных комплексов. В результате образуется вещество определенного цвета. Интенсивность окраски зависит от количества антител в крови пациента к каждому конкретному возбудителю.

Оценка результатов и предназначение ИФА

Интерпретация результата зависит от нескольких важных нюансов:

1. Оптической плотности лунки.
2. Производителя пластины с лунками (тест-системы).
3. Лаборатории, в которой выполнялось исследование.

Учитывая эти нюансы, никогда не следует сравнивать два результата с разных тест-систем или из разных лабораторий.

Анализ крови методом ИФА служит:

1. Для поиска различных антигенов возбудителей.
2. Для исследования гормонального фона.
3. Для обследования на наличие аутоиммунной патологии.
4. Для обнаружения маркеров онкологических заболеваний.

Разновидности ИФА

Анализ ИФА имеет следующие разновидности:

1. Непрямой.
2. Прямой.
3. Конкурентный.
4. Метод блокирования.

Но на деле сегодня применяется только способ под названием ELISA (enzyme linked immunosorbent assay). В его основе лежит вышеописанная реакция образования комплекса антигена с антителом с изменением окраски на поверхности лунки.

Отдельного внимания заслуживает непосредственно количественный ИФА-анализ крови. Это не разновидность анализа, а способ оценки результатов. Благодаря ему подсчитывается количество антител и определяются их классы. Результат зависит от оптической плотности пробы, тест-системы, на которой выполнялся анализ ИФА, а также от лаборатории.

Заболевания, выявляемые ИФА

ИФА – анализ крови, позволяющий выявить огромное количество различных инфекционных заболеваний. Притом с одинаковой точностью выявляются как вирусные, так и бактериальные заболевания. Например, с помощью образования иммуннокомплексов можно доказать наличие антигенов возбудителей следующих заболеваний:

1. Вирусных гепатитов A, B и С.
2. ВИЧ-инфекции и СПИДа.
3. Вируса Эпштейна-Барр.
4. Вируса герпеса всех видов.
5. Цитомегаловируса.
6. Кори.
7. Токсоплазмоза.
8. Сифилиса и многих заболеваний, передающихся половым путем (ЗППП).
9. Паразитозов и других заболеваний.

Кроме того, ИФА позволяет обнаружить:

1. Маркеры онкологических заболеваний — ФНО (фактор некроза опухоли), ПСА (простатспецифический антиген), РЭА (раково-эмбриональный антиген), СА-125 (маркер опухолей яичников)
2. Гормон беременности — ХГЧ (хорионический гонадотропин).
3. Нарушения репродуктивной системы: гормоны женской и мужской половой систем.
4. Патологию щитовидной железы.

Важно упомянуть, что анализ ИФА на ВИЧ сегодня является главным способом диагностики этого опасного заболевания.

Материал для ИФА и техника забора

Для выполнения ИФА у пациента производится забор крови натощак. Далее из крови получают сыворотку, которая непосредственно используется для проведения анализа. Кроме того, ИФА можно проводить на спинномозговой жидкости (ликворе), слизи цервикального канала (шейки матки), околоплодных водах и даже жидкости стекловидного тела (глазного яблока).

Перед сдачей крови пациента предупреждают о том, что он не должен принимать никаких лекарственных препаратов, а лечение антибиотиками и противовирусными препаратами рекомендуется заканчивать не менее чем за две недели до забора крови.

Сроки получения и расшифровка результатов

Сроки получения ответа из лаборатории зависит не от скорости ее работы, а от того, на какой стадии находится заболевание и какие антитела уже появились в крови. Так, к примеру: иммуноглобулины М появляются примерно через 2 недели после взятия крови на анализ и означают, что процесс находится на стадии первичного инфицирования или произошло обострение хронического. Одновременно антитела классов M и G появляются при первичной инфекции. Притом последние могут обнаруживаться спустя 4 недели.

IgA появляются спустя 2–3 недели либо в одиночку, либо вместе с М, означая острую инфекцию, или вместе с G, указывая на хронический процесс.

Такие разные сроки появления антител в крови заставят пациента долго ожидать результата. Допустимо ожидание более месяца после того, как выполнен анализ ИФА. Расшифровка и интерпретация врачом также занимают определенный промежуток времени.

Актуальная информация о ВИЧ-инфекции, наркомании, туберкулёзу, ЗППП

Первый шаг к выявлению заболевания ВИЧ-инфекцией – обследование. Стандартный метод диагностики ВИЧ-инфекции – исследование в иммуно-ферментном анализе (ИФА). В этой статье мы обсудим возможные результаты исследования в ИФА на ВИЧ и их интерпретацию.

Сдаем кровь на ВИЧ

Для анализа на ВИЧ-инфекцию в ИФА используют кровь, в процедурных кабинетах ее берут из локтевой вены. Выработкой АНТИТЕЛ организм отвечает на внедрение ЛЮБОГО чужеродного АНТИГЕНА (белка, микроорганизма). Анализ считается положительным, если в крови обнаруживают антитела (АТ) к ВИЧ. Их наличие регистрируется специальными приборами по оптической плотности.

Анализ в ИФА – стандартный, поскольку даже при получении положительного результата в экспресс-тесте (по крови из пальца или по слюне) потребуется подтверждение. Полученный положительный результат подтверждают в ИФА, с забором крови из вены.

По желанию граждан обследование может быть проведено анонимно.

Результаты лабораторных исследований в ИФА

Положительный результат в ИФА – самый неприятный. Никто не радуется заболеванию. Тем более, если известие о заболевании падает как снег на голову – неожиданно и на фоне полного благополучия. Лаборатории оснащены самым современным диагностическим оборудованием, которые вероятность ошибки практически исключают.

Если это, конечно, не рукотворная ошибка, связанная с небрежностью медработника или лаборанта — их необходимо исключать.

Человеку в такой ситуации трудно принять известие о результате анализа и реагировать на него люди могут по-разному. Для того, чтобы реакции не были непредсказуемыми в ответ на неожиданный результат, проводится до- и послетестовое консультирование.

Во время дотестового консультирования консультант (это не обязательно врач!) должен помочь человеку оценить собственные риски инфицирования. А еще – объяснить, какие результаты могут быть получены, и как это отразится на дальнейшей жизни – после обследования на ВИЧ-инфекцию.

Бывают еще и ложноположительные результаты (ЛПР) исследований. Их причина – перекрестно реагирующие антитела, а не качество диагностических тест-систем. Современные диагностические тест-системы обеспечивают высокую (не менее 98%) специфичность, то есть вполне надежны.

Но есть факторы, влияющие на получение ложно-положительных результатов в ИФА-диагностике. Они хорошо изучены и связаны с происходящими в организме иммунными реакциями. Причем наличие этих заболеваний или состояний вовсе не гарантирует 100%-ое получение ЛПР. Об основных факторах, влияющих на возникновение ЛПР, читайте здесь.

К сожалению, наличие ЛПР позволяет так называемым ВИЧ-диссидентам делать выводы о несовершенстве диагностики и, более того – о том, что ВИЧ-инфекции не существует. Мол, положительный результат теста может быть получен на что угодно. Значит, человеку выставляют диагноз и начинают его лечить неизвестно от чего.

Это не так, поскольку достоверность положительного результата в ИФА подтверждается разными способами. В том числе существует практика повторного взятия новой порции крови. Но самый верный способ удостовериться в правильности полученного результата в ИФА – это анализ в иммуноблоте.

Исследование на ИБ проводятся с помощью тест-полосок, позволяющих определить отдельные белки ВИЧ. Это важно для диагностики.

Да, придется еще пару дней попереживать, это неизбежно.

Отрицательный результат исследования в ИФА, особенно когда вы находились в ситуации риска инфицирования ВИЧ – это удача. Вы обманули статистику и получили шанс не вставать вновь на одни и те же грабли. Получается это не у всех.

Отрицательный результат – не индульгенция на будущие ошибки, а возможность переосмыслить свою жизнь и поведение. Не сделали выводы – обязательно ошибетесь вновь. Не факт, что и на этот раз вам повезет.

Иногда спокойствие хуже беспокойства. Лучше поволноваться понапрасну, чем успокоиться без достаточных к тому оснований. Потому что отрицательный результат тоже может быть ложным. Об этом мы писали здесь.

Ложноотрицательный – это весьма условно. Результат лабораторного исследования формально является отрицательным, врачи-лаборанты не допустили ошибок и качество тест-систем здесь вовсе не при чём.

Почему спокойствие хуже беспокойства? Потому что человек, успокоившись и вздохнув с облегчением, может не изменить своего поведения. Человек, инфицированный ВИЧ, способен передавать вирус практически сразу после заражения.

Запомните!

1. Своевременно установленный диагноз – залог вашего здоровья и безопасности близких людей.
2. ИФА – стандартный метод диагностики, основанный на обнаружении антител к ВИЧ.
3. Для выработки антител требуется время, в среднем – три месяца. Исследование в ИФА, проведенное в эти сроки, может дать отрицательный результат, хотя ВИЧ уже находится в вашем организме.
4. Ложноположительный результат, безусловно, лучше, чем ложноотрицательный. Он может не подтвердиться.

Автор статьи: Олейник Сергей Викторович, врач-эпидемиолог, организатор здравоохранения.

Почему ИФА-тест может давать ложноположительные результаты?

Ложноположительные результаты ИФА-теста на ВИЧ могут наблюдаться при неправильной обработке крови или у больных с такими состояниями и заболеваниями:

• множественная миелома;
• алкогольный гепатит ;
• инфекционные заболевания, спровоцированные вирусом Эпштейна-Барр;
• состояние после диализа ;
• аутоиммунные заболевания;
• на фоне беременности;
• состояние после вакцинации.

При вышеописанных причинах в крови могут присутствовать неспецифические перекрестно реагирующие антитела, выработка которых была спровоцирована не ВИЧ-инфекцией.

В последние годы частота ложноположительных результатов существенно снизилась благодаря применению тест-систем III и IV поколения, которые содержат более чувствительные пептидные и рекомбинантные белки (они синтезируются при помощи генной инженерии in vitro).

Выявление ложноположительного результата не означает, что человек инфицирован ВИЧ. В таких случаях ВОЗ рекомендует провести еще один ИФА-тест (обязательно IV поколения).

Анализ крови ИФА на ВИЧ-инфекции

Исследование образцов крови при помощи ИФА на ВИЧ-инфекцию — это один из самых ранних и достоверных методов диагностики. Иммуноферментный тест состоит в числе немногих исследований наряду с ПЦР, которые с большой степенью вероятности подтверждают либо опровергают такой страшный диагноз, как ВИЧ-инфекция или СПИД.

С момента выявления первых случаев заражения вирусом иммунодефицита на территории советского пространства, а это 1983 год. Лекарство, которое полностью бы исцеляло эту инфекцию, а также вакцина к ней, не были изобретены, но этот процесс находится в стадии активной разработки.

Какой-то особенной подготовки к сдаче анализа крови на ВИЧ не требуется, однако лучше придерживаться простейших правил:

• лучше не кушать с вечера, а сдавать анализ натощак утром;
• не советуют загружать организм физической работой;
• употреблять здоровую пищу, воздержаться на некоторое время от сигарет и алкоголя;
• для исключения ложных показателей теста не стоит сдавать анализ после лечения серьезных заболеваний.

Сама процедура сдачи анализа осуществляется довольно быстро, а вот исследование образца и определение показателей проходит от нескольких дней до половины месяца. В случае, если у вас есть боязнь уколов или вы склонны к головокружениям от вида крови, стоит заблаговременно известить об этом медперсонал.

Обычно перед сдачей анализа медицинский работник просит заполнить анкету, в которой вы подписываете пункт о согласии на проведение процедуры. Специалист предлагает брошюры для ознакомления, объясняет основные принципы проведения теста:

• Кожный покров локтевого сустава пациента обрабатывается обеззараживающей жидкостью;
• Пережимают локтевую вену специальной повязкой, ограничивая отток крови;
• С помощью шприца производят забор материала из вены пациента, обычно 5 мл;
• Использованный шприц выбрасывают, пациенту обрабатывают место инъекции и просят согнуть руку в локте, чтобы уменьшить кровотечение;

Вы, возможно, будете ощущать некоторый дискомфорт при проведении анализа и даже болезненные ощущения при использовании шприца. Дрожь в руке после забора крови – нормальное явление. Дышите ровно, не стоит волноваться – дискомфорт быстро исчезнет.

Проба материала подвергается тщательному лабораторному исследованию: в специальном медицинском приборе – чашке Петри находится жидкость с антигеном. Антиген – чужеродный микроорганизм, провоцирующий защитную реакцию организма.

Испытуемую пробу крови смешивают с жидкостью в чашке Петри. Антитела, содержащиеся в крови, образуют соединения с антигеном, а специалист визуально фиксирует изменение окраски вещества. То есть результат теста положительный, антитела найдены, значит, инфекция есть в организме. Результат анализа действителен 4 месяца.

Как правило, проведение анализов не представляет опасности для здоровья, тем не менее, редкие случаи осложнений имеют место быть:

• Обморочное состояние, если пациент слишком эмоционально переживает процедуру;
• Образование гематомы на месте инъекции;
• Попадание инфекции при инъекции;
• Плохая свертываемость крови.

Если пациент подвержен этим рискам, болен гемофилией или испытывает другие проблемы, препятствующие нормальному проведению анализа, необходимо в первую очередь сообщить об этом врачу.

дата/ тест-система/ отсекающий коэф./ получ.коэф./ результат

24.03 GS ULTRA Ag- 9 12,17 полож.

25.03 Labsystems 3,5 3,9 полож.

После этого мне вынесли заключение об инфицированности ВИЧ. Спрашивала про иммуноблотинг они ничего не отвечают. Муж сдал анализ у него -. Мы с ним живем уже 4 года. На 7-8 недели беременности переболела гриппом, симптомов похожих на ВИЧ не наблюдаю.

Скажите, что мне делать, как действовать дальше? Может ли это быть ложноположительным результатом из-за беременности или другой причины. В больнице даже слышать не желают, говорят,что ВИЧ 100%, ставят на учет.

1. Действительно ли достаточно нескольких ИФА разных тест систем для постановки диагноза и имею ли я право их увидеть? Должен ли я продолжать настаивать на ИБ?

2. Могу ли я анонимно сдать анализ ИБ (платно или бесплатно) и где? (Днепропетровск или Киев)

3. Результаты иммунограммы (сдавал в частной клинике) показывают повышение относительных лимфоцитов (51%), понижение СД4 (23% или 0,40г/л) и сильно пониженны СД8 (10% или 0,17 г/л). Специфичным для ВИЧ является сильное повышение СД8, но не уменьшение.

2.Сдать можете только в частных платных лабораториях в Киеве-и методом ПЦР и ИБ.

3.Иммунограмма при ВИЧ может быть как нормальной,так и с заниженными или завышенными определёнными показателями — это зависит от стадии заболевания,количества вируса в крови,длительности процесса,сопутствующих болезней и многих других факторов.

недели выспались лимфоузлы и очень болели: затылочные, подчелюсные, надключичные, паховые и температура 37,5, антибиотик не помог. Через месяц началась боль в мышцах и суставах, онимение, герпес на губе, переболела ОРВИ, лимфоузлы и мышцы болят по сей день, онко маркеры и ПЦР ЦМВ и ВЭБ отрицательный.

ИФА на ВИЧ 5 и 10 недель отрицательный.Розвернутый анализ крови в норме, УЗИ ОЧП и лимфоузлов в норме, они не большие до 0,5-0,8см, но болят, врач УЗИ сказала, что похоже на вирусное происхождение. Это может быть ВИЧ?

Диагностика ВИЧ-инфекции

Метод ИФА на ВИЧ-инфекцию нацелен на обнаружение в образце крови человека антител к вирусу иммунодефицита. Попадая в организм, ретровирусы к группе которых относится ВИЧ-инфекция, не сразу начинают активный захват иммунных клеток СD4 (Т-лимфоцитов).

Но дожидаться, пока агрессивные агенты начнут смертельную деятельность в организме не стоит. Не секрет, что при любом заболевании, и ВИЧ-инфекция не является исключением, чем раньше начата терапия, тем эффективнее исцеление.

Когда дело касается вируса иммунодефицита человека, случаи полного исцеления официально зафиксированы не были. Но это совсем не значит, что нужно опустить руки, и пустить заболевание на самотек. С ВИЧ-инфекцией люди живут до 75–80 лет при условии выявления на начальной стадии и постоянной поддерживающей терапии.

Метод иммуноферментной диагностики ВИЧ-инфекции имеет высокую достоверность около 97–99%. Но именно эта незначительная часть в 1–3% может давать ложноположительный либо ложноотрицательный результат диагностики ВИЧ-инфекции при помощи ИФА.

ВИЧ — бич нашего поколения. Какие существуют методы для диагностики ВИЧ, углубленная информация о ИФА-тесте на ВИЧ. Как сдавать, как трактовать результаты анализа.

Учеными поколения 20-го века разработано несколько методов диагностики ВИЧ, важнейшим из которых считают иммуноферментный анализ. ИФА на ВИЧ стали проводить относительно недавно – в начале девяностых годов.

ИФА – первый анализ, с которым сталкивается пациент при обследовании на ВИЧ. Метод ИФА определяет наличие в крови антител. Если тест находит присутствие антител в крови, значит, и вирус присутствует. Однако, информацию по этому тесту необходимо подкреплять и другими анализами, такими как иммунный блоттинг (ИБ) и метод последнего поколения — полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Антитела – специальные белковые соединения, которые продуцируют плазматические клетки после как реакцию на попадание в организм инфекции (антитела начинают образовываться через 1-2 месяца с момента заражения).

Самым распространенным методом диагностики ВИЧ-инфекции является иммуноферментный анализ (ИФА), с помощью которого в сыворотке крови больного выявляются антитела к ВИЧ.

Иммуноферментный анализ (ИФА) позволяет выявлять в крови суммарный спектр антител к структурным белкам ВИЧ. В том случае если исследуемая сыворотка или плазма дала дважды положительный результат в ИФА, она тестируется в подтверждающем тесте иммуноблота (II этап).

В этом анализе используется два типа реакций: иммунологическая и ферментативная.

Наибольшее распространение получил гетерогенный вариант иммуноферментного анализа, при котором антиген (определяемое соединение) или антитела фиксируется на твердой основе, в качестве которой могут выступать полистироловый планшет, полистироловые бусины, пористая подложка или магнитный носитель.

Анализ проводят в 3 стадии. В лунку планшета, содержащую на своих стенках тот или иной антиген (т.е. один из белков вируса), добавляют исследуемый биологический материал — сыворотку крови больного. При наличии в организме инфекционного агента, в сыворотке появляются антитела к нему. Они прочно связываются с антигеном и не удаляются при последующей промывке чашки.

На следующем этапе необходимо определить, образовался или нет в лунке иммунный комплекс, то есть произошло ли соединение антигена с антителом. Простым глазом или под микроскопом это нельзя увидеть, поэтому требуются следующие две стадии, которые можно назвать проявляющими.

Для этого на третьей стадии в ту же лунку вносят раствор субстрата и специального бесцветного вещества — хромогена, который способен окрашиваться в результате серии биохимических реакций, осуществляемых присутствующим в лунке ферментом.

Если в лунке появляется окраска, это означает, что все элементы цепочки присутствуют. Из этого следует вывод: в крови пациента имеются антитела к антигенам ВИЧ и, следовательно, сам пациент инфицирован этим вирусом.

Существуют и другие варианты метода ИФА. Например, можно детектировать не антитела, а сам антиген. Процедура в целом будет похожей, хотя немного более сложной.

Результаты анализа могут быть положительными, отрицательными или сомнительными.

При отрицательном результате и отсутствии подозрения на недавнее (в течение последних 6 месяцев) заражение, можно считать диагноз ВИЧ неподтвержденным. Если есть подозрение на недавнее заражение, проводят повторное исследование.

ИФА может дать как ложноотрицательный, так и ложноположительный результат.

Ложноотрицательный результат ИФА возможен при свежем инфицировании, пока антитела к ВИЧ еще не выработались организмом больного.

Поэтому при получении положительного результата ИФА его обязательно перепроверяют более чувствительными методами.

В России для диагностики ВИЧ-инфекции проводится стандартная процедура, включающая в себя два уровня:

• ИФА тест- система (скрининговый анализ);
• иммунный блоттинг (ИБ).

Причины возникновения ВИЧ

Вирус иммунодефицита человека – одна из самых страшных инфекций для нашего поколения.

ВИЧ деструктивно влияет на нашу иммунную систему, и если вовремя не остановить прогресс заболевания, он может трансформироваться в синдром приобретенного иммунодефицита. ВИЧ распространяется через непосредственный контакт партнеров при сексуальном акте через мужские и женские половые органы.

Еще одной причиной заражения может стать попадание вируса через кровь. Это происходит вследствие использования нестерильных инструментов, переливанием зараженной крови и даже через поколения: ребенку от инфицированной матери при кормление грудью.

До сих пор ученые по всему миру ломают голову над созданием лекарства нового поколения, способного излечить от СПИДа, однако, несмотря на большие темпы научного прогресса, вирус иммунодефицита человека продолжает распространяться по планете.

Врач выпишет вам направление на анализ, если вы контактировали с человеком, зараженным ВИЧ либо существует опасность инфицирования. К группе опасности заражения ВИЧ относят поколения людей:

• проходящих в течение месяца курс инъекционного лечения;
• имеющих сексуальные отношения без специальных средств предохранения;
• переносчиков инфекций, передающихся во время сексуального контакта;
• пациентам после прохождения процедуры переливания крови либо укола обнаружения причины свертывания крови в восьмидесятые годы.

Если у вас есть сомнения относительно вашего ВИЧ-статуса и опасения, связанные с возможностью заражения, рекомендуется незамедлительно обратиться за помощью в любое медицинское учреждение нашей страны для проведения комплексного обследования на ВИЧ.