Лимфоциты при раке простаты

Нельзя однозначно сказать, каким будет анализ крови при злокачественных заболеваниях.

Это зависит от того, какой вид опухоли развивается, кроме того, рассматривается ее локализация и характер протекания болезни. Немаловажное значение имеют и индивидуальные особенности организма каждого человека.

Но все же можно выделить некоторые общие отличительные особенности результатов исследования крови, которые помогут опытному доктору заподозрить развитие злокачественного процесса.

Согласно расшифровке анализа крови, при онкологии изменяется качественный состав и количественное значение лейкоцитов.

Лейкоцитами называют белые клетки крови, которые принимают участие в иммунной защите организма от вирусной, бактериальной, паразитарной инфекции.

В клиническом анализе крови при раковых заболеваниях обычно происходит значительное увеличение количества лейкоцитов.

Характерной особенностью развития именно злокачественного процесса является повышение уровня лейкоцитов в крови за счет их молодых форм.

В большинстве случаев общий анализ крови при онкологии определяет повышенное СОЭ – скорости оседания эритроцитов.

Данный показатель является косвенной характеристикой содержания белков плазмы крови.

Врача должен насторожить тот факт, что применение антибактериального или противовоспалительного лечения не приводит к снижению значения этого показателя крови.

Еще одним важным показателем крови, снижение значения которого может указывать на развитие злокачественного процесса, является гемоглобин.

Гемоглобин – особый белок в составе эритроцитов крови, который отвечает за транспортировку кислорода из легких к органам и тканям, и углекислого газа обратно. Врача должно насторожить понижение гемоглобина в крови при отсутствии у пациента кровопотери (при объемных операциях, травмах, обильных менструациях).

Важно, если при этом человек нормально питается и ведет обычный образ жизни.

Наиболее значительно и быстро происходит снижение гемоглобина при развитии рака кишечника и желудка.

При некоторых видах лейкоза, раке печени кроме снижения СОЭ наблюдается уменьшение количества тромбоцитов, повышается показатель свертываемости крови.

Анализ крови при онкологическом заболевании толстого кишечника определяет анемию по причине скрытого кровотечения.

В таком случае это является ранним симптомом злокачественной опухоли. При метастазирующей опухоли снижение гемоглобина в крови (анемия) часто развивается в результате вторичного поражения костного мозга (органа кроветворения).

Наиболее значительно повышается количество лейкоцитов при лейкозах – злокачественных заболеваниях системы кроветворения. В зависимости от вида лейкоза в анализе крови могут обнаружиться лимфобласты (предшественники лимфоцитов) и миелобласты (предшественники нейтрофилов).

При онкологии количество лимфоцитов, лейкоцитов повышается так и понижается. Если количество лимфоцитов ниже необходимого, это говорит о том, что органы, отвечающие за выработку лимфоцитов, повреждены, что не исключает рак костного мозга.

Когда же количество лейкоцитов, лимфоцитов выше нормы, это указывает на злокачественную опухоль, так как лейкоциты борются с вырабатываемыми антителами.

А.Н. Бедняков — аспирант
А.Т. Токтомушев — докт. мед. наук
З.П. Камарли — докт. мед. наук, проф.

In the paper indexes of immune system of patients and a question how a special treatment influences immune status of 16 patients at the age of 55 to 82 who display cancer of the prostate for the first time is investigated. It is established, that most patients with cancer of the prostate are tended to reduction of both common quantity of lymphocytes and their T-population, as well as subpopulation of helpers reduction of quantity of B-lymphocytes and rise of circulating immune sets. The special treatment provides additional immuneslumping effect.

Актуальность. Рак предстательной железы (РПЖ) является большой социальной и медицинской проблемой. В настоящее время это заболевание занимает 2-3-е место в структуре онкологической заболеваемости у мужского населения России и стран СНГ, а в США и ряде стран Европы (Германия, Швеция и др.) — 1-2-е.

При лечении больных со злокачественными новообразованиями, в том числе и РПЖ, применяют наиболее агрессивные виды терапии, и в частности иммунодепрессию, которая нередко является серьезным побочным действием спецлечения, поскольку может усугублять уже имеющиеся нарушения иммунной системы, вызванные самим опухолевым ростом.

В терапии рака предстательной железы в настоящее время используются практически все методы специфического воздействия, применяемые в онкологии — хирургический, лучевой, гормональный, лекарственный. Выбор метода лечения зависит, в первую очередь, от распространенности опухолевого процесса.

Лечебные мероприятия позволяют рассчитывать на достижение благоприятных результатов в лечении больных РПЖ, однако важное значение приобретает изучение влияния данных методов терапии на состояние иммунной системы, поскольку она контролирует опухолевый рост и прогнозирует заболевание.

Определение и оценка состояния иммунного гомеостаза у больных РПЖ представляет особый интерес, особенно при контроле за эффективностью проводимого лечения и для разработки методов иммунотерапии [5, 8, 9]. Существуют немногочисленные исследования по изучению иммунного статуса при РПЖ, в которых указывается на изменения ряда иммунологических показателей [1, 2, 4, 5]. Однако данные об изменении показателей иммунного статуса у больных РПЖ в указанных работах противоречивы.

Цель исследования — изучение изменений и определение влияния проводимой терапии на иммунной статус больных раком предстательной железы.

Материал и методы. Иммунный статус исследовали у 16 больных, у которых впервые выявлен рак предстательной железы в возрасте 55-82 года, у 15 (93,75%) больных в возрасте 60 лет и старше. Локализованную стадию заболевания имели 2 (12,5%) больных, местно-распространенную — 14 (87,5%) (табл. 1).

Таблица 1. Распределение больных РПЖ
по возрастным группам и стадиям заболевания

У всех 16 больных диагноз подтвержден морфологически, у 14 (87,5%) гистологически обнаружена аденокарцинома различной степени дифференцировки, у одного (6,25%) пациента выявлена аденокарцинома с участками криброзного строения и у одного (6,25%) — мелкоацинарный рак (табл. 2).

Таблица 2. Распределение больных РПЖ в зависимости
от гистологической формы опухоли и стадии заболевания

Лечение больных раком предстательной железы включало радикальную позадилобковую простатэктомию, гормонотерапию (в том числе 4 больным с целью андрогенной блокады произведена двухсторонняя орхоэктомия), полихимиотерапию, радикальный курс дистанционной лучевой терапии. Распределение больных в зависимости от метода лечения представлено в табл. 3. Из табл. 3 видно, что большая часть больных — 12 (75%) — получили комбинированное и комплексное лечение.

Исследование иммунного статуса у всех больных проводилось до начала и после специализированного лечения; определяли общее количество лейкоцитов в крови, процентное и абсолютное количество лимфоцитов, субпопуляций Т-лимфоцитов (индукторы/хелперы, киллеры/супрессоры) и В-лимфоцитов, а также содержание циркулирующих иммунных комплексов, иммуноглобулинов A, M, G и фагоцитарную активность нейтрофилов.

Таблица 3. Распределение больных РПЖ в зависимости
от метода лечения и стадии заболевания

В качестве контрольной группы служили данные аналогичных исследований, проведенных у здоровых мужчин-доноров, и средние нормальные значения некоторых показателей иммунного статуса у мужчин соответствующего возраста [3, 4, 6].

Изучение иммунного статуса основано на унифицированной методике определения основных показателей иммунного ответа (микрометод Китаева 1987) [7]. В периферической крови определяли абсолютное количество общего пула лимфоцитов по стандартной методике определения лейкоцитов и лейкоформулы. Процентное и абсолютное количество субпопуляций Т- и В-лимфоцитов оценивали по тестам розеткообразования. Данные методы основаны на взаимодействии мембранных рецепторов Т-лимфоцитов с эритроцитами барана, а В-лимфоцитов с эритроцитами мыши, что визуально определяется при микроскопировании в виде . Методика определения субпопуляций Т-лимфоцитов (индукторы/хел-перы, киллеры/супрессоры) включала в себя тест с теофилином, который основан на различной реакции на теофилин (киллеры/супрес-соры — теофилинчувствительные, индукторы/хелперы — теофилинрезистентные) и отражает суть иммунорегуляторных отношений (ИРИ). Показатели аутоиммунного ответа получали с помощью методики связывания аутоиммунных эритроцитов с лимфоцитами крови, определения содержания циркулирующих иммунных комплексов (метод осаждения ЦИКов в полиэтиленгликоле 3%, 7% и 10%) и определения ревматоидного фактора. Неспецифическую систему резистентности организма оценивали по показателю фагоцитарной активности нейтрофилов поглощать частицы латекса (ФАН). Гуморальное звено определяли по содержанию иммуноглобулинов А, М и G — методом Манчини.

Статистическую обработку данных проводили с использованием математических методов анализа и определения средних величин; их достоверность определяли вычислением

t-критерия Стьюдента и коэффициента вероятности ошибки P с помощью операционной системы Ministat. Размер достоверности: при 95% — Р

1. Баймахашева А.Н. // Съезд онкологов и радиологов Казахстана, 3-й. — Алматы, 1994. — С. 102-103.

2. Ившина А.В., Жумагазин Ж.Д., Заботина Т.Н. и др. // Урология и нефрология. — 1995. — № 6. — С.36-38.

3. Караулов А.В., Земсков А.М., Земсков В.М. // Клиническая иммунология и аллергология. — М., 2002. — С.651.

4. Пантелеева Е.С., Свиридова Т.В., Неприна Г.С. и др. // Урология и нефрология. — 1996. — № 1. — С.28-31.

5. Савинов В.А., Емец В.И., Шкурко В.И. // Иммунология. — 1984. — № 6. — С.64-67.

6. Соколов Е.И., Глан П.В., Гришина Т.И. и др. // Клиническая иммунология. — М., 1998. — С. 272.

7. Тохтабаев А.Т., Гончаров А.Г., Тотолян А.А. и др. Комплекс тестов для оценки иммунного статуса при массовых обследованиях. Методические рекомендации /Под ред. проф. М.И. Китаева. — Фрунзе, 1987.

8. Ярилин А.А. // Клеточные факторы регуляции иммуногенеза. — 1988. — С. 24 — 29.

9. Guinan P., Ray P., Show M. // Clin. Exp. Immunol. — 1987. — Vol. 70. — P 440-448.

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Агаев Н. М., Авдошин В. П., Москалева Е. Ю., Попова О. Н., Северин С. Е.

CD4+CD25+ регуляторные Т-лимфоциты (Tрег) ингибируют индукцию и функции антигенспецифических Т-клеток при активации клеточного антигенспецифического иммунного ответа. Повышенный уровень Трег обнаружен у больных при различных типах опухолей. Целью работы явилось изучение содержания CD4+CD25+ клеток в периферической крови у больных раком и у больных аденомой предстательной железы (РПЖ и АПЖ) в сравнении с больными мочекаменной болезнью , у которых опухолей не было (группа контроля). Уровень Трег в периферической крови определяли с помощью проточной цитофлуориметрии, статистический анализ проводили с использованием метода Стьюдента. У больных АПЖ и РПЖ обнаружено достоверное повышение уровня Трег. Полученные результаты свидетельствуют о возможной роли Трег в подавлении иммунного ответа не только у больных РПЖ, но и при АПЖ. Полученные результаты свидетельствуют о целесообразности проведения исследований, направленных на ингибирование Трег у больных АПЖ и РПЖ.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Агаев Н. М., Авдошин В. П., Москалева Е. Ю., Попова О. Н., Северин С. Е.

CD25+CD4+ regulatory

CD4+CD25+ regulatory Tcells (Treg) have been shown to inhibit the activation and function of T cells that participate in antigen-specific immune responses. Higher levels of Tregs have been reported in the peripheral blood of patients with several types of tumors. The aum of this work was the investigation of the number of CD4+CD25+ cells in peripheral blood of patients with prostate cancer (PC), prostate adenoma (PA) and urolithiasis as control group. Levels of Tregs in the peripheral blood of patients were measured by flow cytometry. Data were analyzed using unpaired Students t test. The levels of Tregs in the peripheral blood of patients with PC and PA were significantly higher than those in control group. These findings show the potential importance of Tregs in modifying immune responses not only in patients with PC but in patients with PA too. Although longer studies are necessary to confirm these findings, these studies also show for the first time the differences in Treg level in peripheral blood of patients with PA, and thus, provide a basis for immunotherapy trials involving the inhibition of Tregs in prostate adenoma and PCa patients.

ИССЛЕДОВАНИЕ СОДЕРЖАНИЯ CD25CD4+ РЕГУЛЯТОРНЫХ Т-ЛИМФОЦИТОВ В ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ПРИ РАКЕ И АДЕНОМЕ ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Н.М. Агаев, В.П. Авдошин

Кафедра урологии и оперативной нефрологии Российский университет дружбы народов ГКБ № 29

Госпитальная пл., 2, Москва, Россия, 111020

Е.Ю. Москалева, О.Н. Попова, С.Е. Северин

Симферопольский б-р, 8, Москва, Россия, 117149

CD4+CD25+ регуляторные Т-лимфоциты (Грег) ингибируют индукцию и функции антиген-специфических Т-клеток при активации клеточного антигенспецифического иммунного ответа. Повышенный уровень Трег обнаружен у больных при различных типах опухолей. Целью работы явилось изучение содержания CD4+CD25+ клеток в периферической крови у больных раком и у больных аденомой предстательной железы (РПЖ и АПЖ) в сравнении с больными мочекаменной болезнью, у которых опухолей не было (группа контроля). Уровень Трег в периферической крови определяли с помощью проточной цитофлуориметрии, статистический анализ проводили с использованием метода Стьюдента. У больных АПЖ и РПЖ обнаружено достоверное повышение уровня Трег. Полученные результаты свидетельствуют о возможной роли Трег в подавлении иммунного ответа не только у больных РПЖ, но и при АПЖ. Полученные результаты свидетельствуют о целесообразности проведения исследований, направленных на ингибирование Трег у больных АПЖ и РПЖ.

Ключевые слова: регуляторные Т-лимфоциты, периферическая кровь, рак предстательной железы, аденома предстательной железы, мочекаменная болезнь.

Иммунологические исследования позволили установить, что причиной подавления противоопухолевого иммунного ответа и низкой эффективности противоопухолевых вакцин при многих злокачественных заболеваниях, в том числе при раке предстательной железы (РПЖ), является появление специфических клеток-супрессоров — CD25+CD4+ регуляторных Т-лимфоцитов (Трег). Эти клетки обеспечивают толерантность иммунной системы к аутоантигенам и ингибируют клеточный противоопухолевый иммунный ответ, так как опухолевые антигены, также как аутоантигены нормальных клеток, могут активировать Трег [1, 2].

CD25+CD4+ Трег характеризуются экспрессией нескольких типов специфических молекул, определяющих их функции. Это FOXP3 (ген, кодирующий фактор транскрипции белок Scurfin), рецептор ИЛ-2, молекула CTLA-4-ассоциирован-ный с ЦТЛ антиген-4 (cytotoxic lymphocyte-associated, antigen-4) и GITR-индуци-руемый глюкокортикоидами рецептор TNF (glucocorticoid-induced tumor necrosis factor reсеptor) [3].

Уровень Трег среди лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, может служить показателем степени подавления противоопухолевого иммунитета [4] и связан с плохим прогнозом, по крайней мере, при раке яичников и раке желудка [5, 6].

В литературе имеется несколько сообщений об увеличении уровня Трег при РПЖ [7—9]. Так показано, что содержание Трег возрастает в опухолевой ткани и в периферической крови у больных РПЖ [8]. Эти же авторы показали, что Трег, выделенные и из ткани опухоли, и из периферической крови, обладали иммуно-супрессорной активностью. Полагают, что Трег появляются уже на ранней стадии опухолевого процесса и что необходимо создание методов подавления или элиминации Трег для отмены иммуносупрессии и активации противоопухолевого иммунитета у больных. При РПЖ уровень Трег возрастает по мере прогрессии заболевания и их содержание необходимо учитывать при назначении иммунотерапии [8, 9].

При изучении культур лимфоцитов больных РПЖ после стимуляции in vitro дендритными клетками, нагруженными смесью специфических для РПЖ антигенов, обнаружен более низкий прирост лимфоцитов, чем в культурах от здоровых добровольцев и более низкая продукция ИФу при повышенной продукции ИЛ-4 [10]. Эти результаты также свидетельствуют о подавлении клеточного противоопухолевого иммунитета, которое может быть связано с присутствием в периферической крови таких больных повышенного уровня Трег.

При аденоме предстательной железы (доброкачественной гиперплазии предстательной железы) — часто встречающейся доброкачественной опухоли у мужчин — сведения об уровне Трег практически отсутствуют.

В связи с этим целью настоящей работы явилось исследование уровня Трег (CD4+CD25+-клеток) в периферической крови больных при РПЖ в сравнении с больными, страдающими другими урологическими заболеваниями — аденомой (доброкачественная гиперплазия) предстательной железы (АПЖ) и мочекаменной болезнью (МКБ).

Материалы и методы. Обследовано 15 пациентов с верифицированным диагнозом РПЖ в возрасте от 59 до 81 года, 9 пациентов с диагнозом АПЖ в возрасте от 61 до 85 лет и 9 пациентов с МКБ в возрасте от 30 до 72 лет без лейко- и лимфопе-нии и лейкоцитоза, находившихся на стационарном лечении в 1-м и 2-м урологическом отделениях ГКБ № 29 им. Н.Э. Баумана. Клиническое исследование включало изучение анамнеза и данных объективного исследования с использованием обычных лабораторно-инструментальных методов. Уровень простатаспецифического антигена (ПСА) у пациентов с диагнозом РПЖ составлял от 6,3 до 110 нг/мл. Контрольной группой считали пациентов, которые находились на стационарном лечении с диагнозом МКБ.

Выделение лимфоцитов проводили с использованием раствора фиколл-пак, на который наслаивали разведенную в два раза фосфатно-буферным раствором (ФСБ) кровь. Пробирки центрифугировали в бакет-роторе 30 мин. при 400 х g при 20 °С. Верхнюю фазу, содержащую плазму, отбрасывали. Лимфоциты, концентрирующиеся в виде кольца на границе раздела между плазмой и средой разделения, собирали в центрифужную пробирку, осторожно отсасывая пипеткой,

промывали два раза ФСБ, центрифугируя суспензию 10 мин. при 250 х g, и суспендировали в ФСБ для последующего исследования фенотипа лимфоцитов.

Статистическую обработку результатов проводили по методу Стьюдента с помощью компьютерной обработки данных в программе Microcal Origin 5,0.

Иммунный статус обследованных пациентов с мочекаменной болезнью, аденомой и раком предстательной железы

Исследуемые показатели Группы обследованных больных по заболеванию

мочекаменная болезнь (МКБ) аденома предстательной железы (АПЖ) рак предстательной железы (РПЖ)

CD4, % 45,70 ± 3,40 33,40 ± 2,70 *1—2 50,40 ± 3,20 *2—3

CD8, % 17,30 ± 1,80 7,90 ± 1,80 *1—2 14,70 ± 1,00 *2—3

ИРИ, усл. ед. 2,90 ± 0,50 7,60 ± 2,40 *1—2 2,50 ± 0,50 *2—3

CD25, % 0,20 ± 0,04 0,52 ± 0,17 0,89 ± 0,28

CD4/CD25, % 0,11 ± 0,03 0,33 ± 0,09 *1—2 0,47 ± 0,13 *1—3

Примечание: * — р 0,05) и был наиболее высоким среди рассматриваемых групп урологических заболеваний.

Анализируя уровень СБ4+СБ25+-лимфоцитов при МКБ, АПЖ и РПЖ (табл. 1) необходимо отметить статистически значимое повышение этого показателя как при АПЖ, так и при РПЖ. При этом наиболее высоким уровень Трег был при РПЖ.

Следует отметить, что у пациентов сравниваемых групп различалось количество СБ4-лимфоцитов. Поэтому, помимо содержания СБ4+СБ25+-лимфоцитов, определяли и долю СБ4+СБ25+-клеток во фракции СБ4+-лимфоцитов. Полученные результаты, представленные на рис. 1, свидетельствуют о том, что и при АПЖ, и при РПЖ содержание СБ4+СБ25+-клеток во фракции СБ4+-лимфоцитов достоверно превышает этот показатель в контрольной группе — группе пациентов с МКБ. При этом необходимо отметить значительные межиндивидуальные различия в уровне Трег при АПЖ и РПЖ. Содержание Трег было повышено лишь у части пациентов, в то время как у другой части больных этот показатель не отличался от соответствующих значений в контрольной группе. В контрольной группе межиндивидуальные различия содержания СБ4+СБ25+-лимфоцитов были незначительны.

В литературе имеются лишь единичные со­обще­ния, рассматривающие состояние им­му­нитета у больных раком предстательной же­лезы (РПЖ), в которых отмечается изменение ряда иммунологических показателей [1,2]. В связи с этим возникает необходимость оценки иммунной системы больных РПЖ для воз­мож­ной ее коррекции. Отрицательное влияние эстрогенотерапии на состояние иммунного статуса больных РПЖ доказано. Имеются сообщения о супрес­сивном действии ци­тоста­тиков, больших доз при радикальной лучевой терапии на по­пул­яции и субпопуляции лим­фоцитов у онкологи­ческих больных.

В настоящее время имеющиеся данные о дифференцировочных антигенах лимфоцитов и их связи с функциональной активностью иммунокомпетентных клеток позволяют оце­нить иммунную систему и выявить целый ряд иммунологических нарушений, связанных с дис­ба­лансом популяций и субпопуляций лим­фо­цитов у онкологических больных. В кли­ни­ческой практике наиболее эффективным и информативным способом является им­муно­фено­типирование лимфоцитов перифери­чес­кой крови с помощью моноклональных анти­тел к дифференцировочным антигенам.

Моно­кло­нальные антитела, получаемые по гибри­дом­ной технологии решили проблему высоко­спе­ци­фичных и стандартных реагентов для ти­пи­рования иммунокомпетентных клеток и в со­четании с методом проточной цитометрии позволяют получать объективную информацию о наличии того или иного маркера на по­вер­ности клеток. Многофакторный анализ ре­зуль­татов иммунофенотипирования позволяет не только определить соотношения эффектор­ных и регуляторных субпопуляций лимфоци­тов, но и косвенно оценить функциональное состояние иммунной системы в целом, что поз­волит проводить адекватную иммунотерапию и повысить эффективность лечения.

Представленная работа является одной из пер­вых по изучению лимфоидных клеток кро­ви у больных РПЖ на основе широкого спектра моноклональных антител (МКА) к диф­ференцировочным антигенам лимфоцитов.

Впервые у больных РПЖ было одно­временно использовано 14 МКА к диф­фе­ренци­ровочным антигенам лим­фо­цитов для их характеристики.

В исследование были включены 73 больных РПЖ. У 23 пациентов иммунофенотип лимфо­цитов определяли до лечения. У больных ло­ка­ли­зованной формой (n=18) иммунологи­ческие исследования проводились после дис­тан­ционной лучевой терапии в суммарной оча­го­вой дозе 66–70 Гр, одновременно в комби­на­ции с антиандрогеном флутамидом (по 250 мг три раза в день) через 30–90 дней после облу­чения. У восьми больных диссеминированным РПЖ эти же исследования проводились после билатеральной орхэктомии (спустя 14–60 дней). У 32 больных РПЖ иммунофенотип рас­сматривался в зависимости от рас­прос­тра­нен­­ности процесса: местно­распростра­ненный (n=16) и диссеминированный (n=16). Кон­тро­лем служили аналогичные исследования, про­веден­ные у здоровых мужчин — доноров. Вли­яние трансуретральной резекции (ТУР) на фено­тип рассматривалось у 21 больного через три–шесть месяцев с момента операции.

Таким образом, фенотип лимфоцитов изу­чали у больных в зависимости от стадии рака (местнораспространенный или диссемини­ро­ван­ный), разных методов лечения без при­ме­не­ния иммунокоррекции и с иммунокор­рекцией, а также у пациентов, перенесших ТУР предстательной железы по поводу выра­женной инфравезикальной обструкции.

Лимфоциты выделяли в градиенте фиколла-верографина. Спектр лимфоцитов периферической крови определяли в реакции непрямой иммунофлюоресценции. В качестве первых антител использовали антитела серии ИКО (ОНЦ МЗРА), направленные к сле­дую­щим дифференцировочным антигенам лим­фо­ци­тов: CDЗ, CD4, CD5, CD7, CD8, CD22, CD25, CD71, НLА-Dг, СD 38, СD45, СDw50, НLА1.

В качестве вторых антител использовали окрашенные ФИТЦ козьи антитела.

Процент антиген-положительных клеток подсчи­тывали в гейте лимфоцитов на ци­то­флюорометре Fascan. Статистическую обра­ботку результатов осуществляли по непара­метри­ческому U — критерию Вилкоксона.

Результаты исследований представлены в табл. 1,2. По сравнению с нормой, у больных местнораспространенной формой РПЖ су­щест­венно снижено как абсолютное коли­чество Т-лимфоцитов (CD3, CD5 и CD7), так и их субпопуляций Т-хелперов (индукторов (CD4) и киллеров) супрессоров (CD8), клеток, несущих активационный антиген CD38, В-лим­­фоцитов (CD 22, НLА -Dг), а также кле­ток, экспрессирующих линейно-неограни­чен­ные антигены (CD50, CD45 и НЬА-1) и анти­ген CD45RА.

Резкое уменьшение количества практически всех популяций и субпопуляций лимфоцитов (исключая уровень CD71- и CD25 -лим­фо­ци­тов, которые в норме присутствуют в мини­маль­ных количествах) позволяет пред­по­ло­жить нарушения дифференцировки лимфо­ид­ных клеток уже на уровне ранних пред­шест­вен­ников.

Сопоставляя уменьшение общего пула лим­фоцитов у больных локализованной формой РПЖ (в 1.5раза) с резким снижением коли­чества популяций и субпопуляций в 1,6–3 раза, а также незначительными отклонениями от нормы их относительных значений, можно сделать заключение об увеличении в перифе­ри­­ческой крови больных РПЖ лимфоцитов, не несущих дифференцировочных антигенов на своих мембранах.

При диссеминации процесса эти нарушения усугубляются: по сравнению с показателями боль­ных с местнораспространенной формой забо­левания достоверно снижено количество Т- лимфоцитов, лимфоцитов, несущих акти­ва­цион­ный антиген CD38, а также общелейкоци­тар­ный антиген CD45, который в норме пред­став­лен на большей части лимфоцитов и играет важную роль в межклеточных взаимо­дейст­виях. Количество лимфоцитов, экспрес­сиру­ющих антигены CD7, CD4, CDЗ у больных диссеминированной формой, не отличается достоверно от таковых значений у больных локализованной формой заболевания, но при сравнении с нормой степень достоверности различий этих показателей выше при дис­семинированном раке.

Как видно из табл. 2, после комбиниро­ван­ного лечения статистически достоверно умень­шается количество CD5- и CD7 -лимфоцитов, CD4 хелперов/индукторов, количество CD25- лимфоцитов, несущих рецепторы к интерлей­кину-2, уменьшается также количество лим­фо­­ци­тов, несущих НLА1-антигены. Видно, что изменения CD45- и CDw50-лимфоцитов, хотя статистически незначимы, носят анало­гич­ный характер.

Сравнительный анализ изменений спектрa лимфоцитов показал, что комбинированное ле­чение оказывает более выраженный им­муно­депрес­сивный эффект нежели кастрация. Тем более, что оно проводилось больным локали­зован­ным раком, у которых первичные из­менения фенотипа лимфоцитов выражены в меньшей степени, чем при диссеминированной форме. Наиболее чувствительными к по­доб­ному воздействию оказались Т-клетки (CD5, CD7), Т-хелперы (CD4), активированные лим­фоциты (CD25), а также лимфоциты, несущие молекулы адгезии.

Подобные изменения наб­лю­даются и в спектре лимфоцитов у больных после кастрации, однако носят менее выра­женный характер и не являются статистически значимыми, исключая резкое уменьшение ко­ли­­чества НLА-Dг — несущих лимфоцитов. Так как снижение количества НLА-Dг лим­фо­ци­тов в равной степени характерно как для кастра­ции, так и для комбинированного ле­че­ния, оно, возможно, связано с анти­ан­дроген­ной направленностью лечения в обеих группах больных.

Таблица 1. Иммунофенотип лимфоцитов у здоровых лиц и больных раком предстательной железы

(местно-распространенного и диссеминированного) (M±m)

Примечание. n–различия достоверны с указанной графой (p 0.05)

Таким образом, наши исследования выявляют значительные нарушения иммуно­логи­ческого равновесия среди больных РПЖ, усугубляющиеся после рутинных методов лечения этого заболевания, что свидетель­ствует о необходимости коррекции иммуни­тета у больных РПЖ.