Скрыто протекающий мастит диагностируют путем исследования молока одним из быстрых диагностических тестов с последующим подтверждением диагноза пробой отстаивания и бактериологически.
Лактирующих коров в хозяйстве обследуют на скрыто протекающий мастит один раз в месяц. Исследуют порции молока после доения.
Лабораторные методы основаны на прямых и косвенных методах подсчёта соматических клеток.
К прямому методу относят подсчет на стекле по Прэскотту-Бриду, который является и контрольным при автоматическом подсчёте соматических клеток в молоке.
При этом чистое предметное стекло кладут на лист бумаги расчерченный на квадраты со стороной 1 см. Пробу молока тщательно перемешивают и с помощью микропипетки наносят на 3-4 квадрата предметного стекла по 0,01 см 3 . Нанесенную каплю молока равномерно распределяют по площади квадрата стеклянной палочкой или препаровальной иглой. Мазок высушивают на воздухе, фиксируют и одновременно обезжиривают нанесением сначала метилового спирта на 10-15 мин, а затем спирт-эфирной смеси до высыхания. Окрашивают мазок рабочим раствором краски Романовского-Гимза (3-4 мл продажного раствора на 100 мл дистиллированной воды) методом подслаивания или при вертикальном положении стекла в течение 20-30 мин. После окрашивания мазок промывают водой и высушивают при комнатной температуре. Подсчет соматических клеток ведут под микроскопом с иммерсионным объективом. В каждом мазке просматривают 100 полей зрения. Подсчитанное число клеток умножают на коэффициент с учетом значений объектива и окуляра и определяют их количество в 1 см 3 молока. Для выведения коэффициента с помощью объект-метра определяют диаметр поля зрения микроскопа и вычисляют площадь одного поля зрения по формуле яR 2 . Затем вычисляют, сколько полей зрения микроскопа размещаются на площади 1 см 2 . Полученный результат переводят на объем.
Пример: определение коэффициента пересчета при окуляре 7 и объективе 90. В поле зрения размещается 17 делений объект-метра. Величина одного деления — 0,01 мм. Диаметр поля зрения — 0,01 мм х 17 = 0.17 мм, радиус — 0,085 мм. площадь одного поля зрения — 3,14 х 0,085 2 = 0,023 мм 2 или 0,00023 см 2 . Площадь полей зрения будет равна 0,00023 см 2 х 100 = 0,023 см 2 . На площади 1 см 2 таких участков будет: 1: 0,023 = 43,48. Взятый объем молока 0,01 см 3 в 100 раз меньше 1см 3 . Коэффициент в данном случае будет равен 4348 (43,48×100).
За окончательный результат принимают среднее арифметическое двух параллельных определений.
К прямым методам подсчета соматических клеток относят камерные методы по Н.М. Хилькевичу, И.И. Архангельскому и др. в модификации В.И. Слободяника, подсчет с помощью электронного прибора «Фоссоматик». электронных счетчиков частиц: целлоскоп, «Культер-Каунтер», пикоскель, гемоцитометр кондуктометрический марки ГЦМК-3 и др.
Косвенно соматические клетки определяют с помощью диагностических реактивов беломастина, мастидина, димастина, мастоприма, пробы Уайтсайда, содержащих поверхностно-активные вещества (ПАВ). ПАВ разрушают мембраны клеток, высвобождают из ядер ДНК и вступают с ней в реакцию, образуя желе. По степени образования желеобразного сгустка косвенно судят о количестве соматических клеток в молоке. Реакцию молока с диагностическим реактивом проводят на молочно-контрольных пластинках ПМК-1 или ПМК-2, имеющих 4 луночки, соответственно долям вымени коровы. Определение соматических клеток с помощью диагностических реактивов проводят в молоке из отдельных долей вымени или удоя коровы.
После каждого исследования необходимо промывать молочно-контрольные пластинки.
Проба с беломастином. Реакция основана на способности поверхностно-активного вещества образовывать гель с молоком, содержащим соматические клетки. При исследовании молока (секрета) из вымени коров, диагностикум разводят дистиллированной или кипяченой водой в соотношении 1: 3 (к 100 мл беломастина добавляют 300 мл воды). Срок использования рабочего раствора 8 месяцев.
Для проведения пробы с беломастином в луночки молочно-контрольной пластинки (МКП-1) из соответствующих долей вымени выдаивают по 1 мл испытуемого молока и добавляют 1 мл рабочего раствора диагностикума с помощью пипетки. Смесь молока с реактивом перемешивают стеклянной палочкой в течении 9-10 секунд. Результаты реакции:
отрицательная реакция (-) — жидкая смесь остаётся однородной;
сомнительная реакция (-, +) — в смеси образуются слизистые нити;
положительная реакция (+) — смесь приобретает консистенцию слизистой массы или желеобразного сгустка.
Для контроля результатов лечения больных маститами животных молоко исследуют на 10-14 день после введения препаратов.
В сборном молоке при отрицательной реакции в 1 мл содержится до 500 тыс. соматических клеток, при сомнительной — от 500 тыс. до 1 млн; при положительной — свыше 1 млн.
Проба с 2% раствором мастидина. Для приготовления 2% раствора мастидина к 100 мл 10% раствора, выпускаемого отечественной промышленностью, прибавляют 400 мл дистиллированной или прокипяченной воды. В луночки молочно-контрольной пластинки (ПМК-1, ПМК-2) из соответствующих долей вымени надаивают по 1 мл молока и добавляют 1 мл приготовленного 2% раствора мастидина с помощью пипетки-автомата или дозатора жидкости. Смесь молока с реактивом перемешивают палочкой в каждой луночке ПМК-1 поочередно в течение 10-15 секунд. При использовании ПМК-2 смешивание молока с реактивом проводят одновременно во всех луночках, путем ротационного вращения пластинки в горизонтальной плоскости. Реакцию учитывают по густоте желе:
отрицательная реакция (-) — однородная жидкость;
сомнительная реакция (-, +) — следы образования желе;
положительная реакция (+) — ясно видимый сгусток, который можно выбросить из луночки палочкой при перемешивании.
На пластинке ПМК-2 при отрицательной реакции:
(-) — образуется однородная смесь;
(-,+) — при сомнительной реакции во время вращения пластинки на дне луночки заметны тонкие нити (тяжи) без тенденции образования сгустка;
(+) — положительная реакция отчетливое появление слабого или быстро образующегося плотного сгустка, концентрирующегося при вращении пластинки в центре луночки.
Определение рН молока по цвету с 2% раствором мастидина:
светло-сиреневый, дымчатый — рН молока нормальная (рН = 6,5-6,8);
почти белый — повышенная кислотность молока (рН меньше 6,5);
темно-сиреневый — повышенная щелочность молока (рН больше 8).
Проба с 5% раствором мастидина. Раствор мастидина готовят на дистиллированной или прокипяченной теплой воде.
Постановку пробы и учет реакции желеобразования проводят как при исследовании молока с 2% раствором мастидина.
Определения рН молока по цвету:
оранжевый, оранжево-красный (красно-оранжевый) — нормальная реакция молока (рН = 6,5-6,8);
желтый — повышенная кислотность молока (рН меньше 6,5);
красный — повышенная щелочность молока (рН больше 6,8);
алый и малиновый — ярко выраженная щелочность молока (рН больше 7.0).
Проба с 1% раствором мастоприма. Препарат мастоприм представляет собой порошок желтоватого цвета, состоящий из смеси сульфанола (4 части) с едким натрием (1 часть). Раствор мастоприма готовят на дистиллированной воде.
Постановку пробы и учет реакции желеобразования проводят как при исследовании молока с 2% раствором мастидина.
Проба с димастином (по В.И. Мутовину.) Димастин включает в себя 2 реагента: поверхностно активное вещество акрилсульфонат и индикатор бромкрезол пурпур.
Проба позволяет одновременно выявлять в молоке щелочную реакцию и повышенное содержание клеток. Для этого в лунку молочно-контрольной пластинки вносят пипеткой по 1 мл исследуемого молока. Добавьте к нему из склянки 1 мл 5% раствора димастина. Стеклянной палочкой смешивают0 молоко с реагентом и сравните показания реакции. Молоко из больной четверти приобретает малиновый цвет и образует желеобразный сгусток. Молоко из здоровой доли — оранжевый цвет, а его консистенция не изменяется.
Проба Уайтсайда. Проба основана на косвенном учете повышенного содержание лейкоцитов и эпителиальных клеток. В лунку молочно-контрольной пластинки вносят глазной пипеткой 5 капель молока и добавляют 2-3 капли 4% водного раствора едкого натра. Реактивную смесь перемешивают стеклянной палочкой 20-30 сек. Молоко из больной доли вымени дает образование желеобразного сгустка.
Проба с розоловой кислотой. В лунку молочно-контрольной пластинки вносят 10 мл молока и добавить 1 мл 0,1% раствора розоловой кислоты на 65% спирте. В норме содержимое приобретает светло-розовую окраску. При патологии окраска содержимого имеет цвет от светлого до темно-красного.
Проба с мастит-диагностом. В состав мастит-диагноста входит: вода 100 мл, сульфанол-30, тринолинфосфат-5г, бромтимоловый синий — 0,02г, 1% раствор розоловой кислоты-0,5 мл.
В лунки молочно-контрольной пластинки вносят 1 мл молока и 1 мл реактива и смешивают. Гомогенная смесь — молоко от здоровых коров; наличие плотного желеобразного сгустка, тягучей массы или редко слизи — положительная реакция на скрытый мастит.
Бромтимоловая проба по Эрасту. Реактив: 0,1 г бромтимолблау + 100 мл 96 0 спирта. Берут 5 мл молока и добавляют 1 мл реактива, встряхивают в пробирке. При норме цвет желтоватый, желтый, желто-салатовый, желто-зеленый. Патология — светло-зеленый, зеленый, ярко-зеленый, сине-зеленый и синий цвет
Бромтимоловая проба по Логвинову. Реактив: 0,1 г бромтимолового индикатора + 20 мл 96 0 спирта + 80 мл дистиллированной воды. Берем 1 мл молока и 1 мл бромтимоловой пробы в луночки прибора для определения качества молока. Если появляется синяя окраска смеси, то реакция положительная. Если желтоватый цвет или без изменений, то реакция отрицательная.
Проба с бензидином. Используется для выявления в молоке пигментов крови. В пробирку наливают 5 мл 3% -ного раствора перекиси водорода и 2 мл насыщенного раствора бензидина в ледяной уксусной кислоте. После тщательного взбалтывания в смесь прибавляют 2-10 капель молока. Положительная реакция — смесь окрашивается сначала в зеленый, а через минуту в темно-синий цвет; отрицательная — смесь светлая с беловатым хлопьевидным осадком.
студент, кафедра ветеринарной медицины СХИ ХГУ им. Н. Ф. Катанова,
канд. ветеринар. наук, доцент кафедры Ветеринарной медицины СХИ, ХГУ им. Н. Ф. Катанова,
Молочное скотоводство — это важная отрасль животноводства, на развитие которой оказывает влияние много факторов: экономическая ситуация на рынке, прибыль хозяйств, цены на молоко, качество производимой продукции и заболевания молочных коров, в том числе с воспалением молочной железы. Субклинический мастит у коров встречается очень часто. [1, с. 88]
Мастит – воспаление молочной железы, развивающееся вследствие механических, термических, химических и биологических факторов. [4, с. 480]
Данное заболевание является актуальным во всех хозяйствах, где развито молочное скотоводство. Болезни вымени у крупного рогатого скота представляют собой огромную социально-экономическую проблему. Вследствие них возникают большие потери молока за счет снижения молочной продуктивности коров, уменьшения сроков хозяйственного и племенного использования, снижения качества молока и молочной продукции.
Несмотря на достижения в диагностике, лечении и профилактике мастита, количество заболевших коров за последние годы сильно возросло. В молоке у коров увеличивается содержание соматических клеток, изменяется уровень лактозы, белков, ферментов и свободных жирных кислот. Все это приводит к изменению свойств, вкуса и качества молока, также продуктов его переработки.
Экономический ущерб, наносимый маститом, складывается из:
- Снижения молочной продуктивности у переболевших маститом коров.
- Преждевременная выбраковка высокоценных животных.
- Снижения качества молочных продуктов (масла, сыров, сметаны, кефира и др.) и их несоответствия мировым стандартам.
- Затрат на диагностику и лечение.
- Высокой заболеваемости телят и их падежа.
- Снижения оплодотворяемости (в период болезни молочной железы нарушается течение полового цикла).
Заболевание коров скрытым маститом приводит к снижению удоя за лактацию от 3-25 % в зависимости от возраста животных, уровня продуктивности, длительности болезни.
Различные нарушения воспроизводительной функции коров при этом происходят из-за переноса гематогенным путем патогенных микроорганизмов и передачи рефлекторным путем болевых ощущений из молочной железы к половым органам. [1, c. 88]
Молозиво и молоко, полученное от коров с воспалением вымени, снижает иммунитет телят, вызывает задержку роста, и даже гибель молодняка. Отставание в росте телят, родившихся от больных маститом матерей, наблюдали и другие авторы. [1, с. 88; 3 с. 53]
В настоящее время установлено, что стафилококки могут выделять экзотоксины, вызывающие поражение желудочно-кишечного тракта у людей и животных, иногда заканчивается летально. [2, с. 256]
Из-за многих негативных факторов важным является борьба с этим заболеванием. Благодаря ранней диагностике, своевременному эффективному лечению и профилактике можно снизить уровень заболеваемости. В настоящее время, существует большое количество методов диагностики, комплексных противомаститных препаратов и способов профилактики, но вопрос борьбы с маститом остается открытым. [4, с. 480]
В этиологии мастита большую роль играют способствующие факторы:
- Анатомические и функциональные аномалии молочной железы.
- Погрешности в кормлении и содержании (скармливание заплесневелого сена, соломы, силоса, а также ядовитых растений; микробы, попавшие с подстилки и необработанных доильных стаканов в сосковый канал или трещины сосков).
- Нарушения технологии и санитарно-гигиенических правил машинного доения.
- Болезни кожи вымени (дерматит, трещины и раны сосков, ушибы, переохлаждения, фурункулез и др.).
- Болезни репродуктивных и других органов (возбудитель, проникший в молочную железу через кровь и лимфу при заболевании половых органов или органов пищеварения).
- Наследственная предрасположенность к маститу.
- Инфекционные заболевания: туберкулез, бруцеллез, паратифозная инфекция.
В период сухостоя возбудителями мастита являются те же микроорганизмы, что и в период лактации. В 85 % проб молока, из пораженных маститом долей вымени коров в этот период, выделяются патогенные стафилококки, диплококки, сальмонеллы, кишечная палочка. В 76,5 % проб микрофлора представлена одной культурой, а в остальных – 2-3 видами бактерий.
Причинами возникновения нарушения функции молочной железы являются колебания вакуума при машинном доении, передержка доильных стаканов после выдаивания, работа на неисправных аппаратах, использование сосковой резины с неодинаковой жесткостью или с разной степенью растяжения в доильных стаканах одного аппарата. [4, с. 480]
Клинические признаки при таком мастите отсутствуют или выражены слабо, снижается секреция молока и его качество. Такие маститы диагностируют по изменению физико-химических свойств молока и по результатам его бактериологического исследования (устанавливают количество микробов в 1 мл молока, определяют их вид). [3, с. 53]
При своевременной и быстрой диагностике маститов можно провести эффективное лечение этого заболевания и разработать необходимые меры профилактики. Экспресс — диагностика субклинического мастита в период лактации основана на определении количества соматических клеток в молоке, а также с помощью диагностических реактивов (2 % раствор мастидина, 5 % раствор димастина, 2 % раствор масттеста, кенотестом) с пробой молока. [3, с. 53]
Мастит или воспаление молочной железы крупного рогатого скота – очень широко распространенное инфекционное заболевание, которое может протекать в скрытой (субклинической) форме и хорошо выявляемой клинической форме различной степени тяжести. Особенно остро проблема маститов проявляется в условиях крупных и средних хозяйств с машинным способом доения. Развитие этого заболевания приводит к снижению продуктивности по молоку и существенной потере его качества.
Своевременная диагностика и лечение маститов – чрезвычайно важная задача, решение которой необходимо для предотвращения распространения заболевания и материальных потерь предприятия. Хорошей практикой является регулярный скрининг поголовья на наличие особей носителей мастита. Диагностику следует проводить как в лактационный, так и в сухостойные периоды.
Если ветеринарным врачом выявлены случаи, указывающие на развитие мастита у коров, то необходимы мероприятия, направленные на профилактику (у здоровых особей) и лечение данного заболевания. Препарат МАСТОФЕРОН, выпускаемый компанией БелАгроГен, является одним из наиболее популярных средств для профилактики и лечения маститов у крупного рогатого скота.
МАСТОФЕРОН предназначен для лечения субклинических и клинических (серозных и катаральных) форм мастита у коров в период лактации. Активным компонентом препарата является белок интерферон, который полностью соответствует аналогичному белку в организме коров. Данный белок является индуктором бактерицидной и лизоцимной активности и способствует повышению иммунитета у коров. МАСТОФЕРОН представляет собой гель, находящийся в шприце-дозаторе. Количество препарата в одном шприце равняется одной разовой дозе для крупного рогатого скота, что делает его удобным в применении на практике.
Для получения наиболее эффективных результатов при лечении маститов у коров на разных стадиях развития заболеваний следует учитывать некоторые особенности применения препарата МАСТОФЕРОН.
Важно:
Перед применением препарата из пораженных долей вымени необходимо полностью удалить содержимое, а сосок обработать антисептиками. Для введения необходимо снять колпачок со шприца-дозатора, ввести наконечник дозатора в сосковый канал и выдавить содержимое в сосок.
В некоторых случаях непосредственно после введения ПРЕПАРАТ МОЖЕТ ВЫТЕКАТЬ ИЗ СОСКА. Для предотвращения вытекания препарата необходимо сжать верхушку соска и провести массаж обрабатываемой доли вымени другой рукой, передвигая ее снизу вверх в течение 20-30 секунд.
Далее приведены схемы лечения маститов в различных его формах при помощи препарата МАСТОФЕРОН.
Субклиническая форма мастита
При субклиническом течении мастита МАСТОФЕРОН применяют по следующим схемам.
Родильное отделение. Для первотелок и коров, находящихся в родильном отделении, препарат используют дважды в день с промежутком 8-14 часов на протяжении трех дней. Разовая доза ведения препарата составляет 10 г или один шприц-дозатор. Препарат необходимо вводить только после доек. Введение препарата в вымя, заполненное молоком, существенно снижает эффективность его применения.
Лактирующие коровы. Схема лечения коров в период лактации при субклиническом течении мастита практически аналогична за исключением того, что длительность применения составляет от трех до пяти дней. Не редки случаи, когда субклиническое течение мастита переходит в хроническую форму из-за несвоевременного или недостаточно эффективного лечения коров. При хроническом течении мастита совместно с МАСТОФЕРОНОМ рекомендуется использовать антибактериальные препараты, например, РЕЦЕФУР или РЕЦЕФУР ПС-200.
Клиническая форма мастита
Если субклиническая форма течения болезни переходит в клиническую, то следует применять МАСТОФЕРОН для лечения маститов у коров в комплексе с антимикробными препаратами.
В этом случае МАСТОФЕРОН используют по схеме аналогичной схеме лечения субклинического мастита у коров, однако длительность его применения зависит от степени тяжести заболевания. Как правило, применение препарата прекращают по истечении 3-5 дней или до полной нормализации уровня соматических клеток в молоке.
Совместно с МАСТОФЕРОНОМ в качестве антимикробных препаратов рекомендуется использовать суспензию для инъекций РЕЦЕФУР или РЕЦЕФУР ПС-200. Активное вещество в данных препаратов обладает широким спектром противомикробного действия, в том числе против стрептококков и стафилококков, которые считаются основными возбудителями мастита у крупного рогатого скота.
Для облегчения состояния и снятие воспаления хорошо подходит мазь МАСТИНЕТ, которая обладает локальным антисептическим и сосудорасширяющее действие.
Мастит – одно из самых распространенных заболеваний вымени коров. Это обусловлено большим количеством факторов, способствующих появлению болезни. Чаще всего в хозяйствах встречается субклинический мастит. Воспаление вымени в таком случае протекает в скрытой форме. В этом случае о наличии мастита в вымени свидетельствует количество соматических клеток в молоке коровы.
Соматические клетки – клетки тканей многоклеточных организмов, в случае с коровами они состоят из лейкоцитов и эпителия железистой ткани. В молоке здоровой коровы может присутствовать в среднем 100-200 тыс. соматических клеток на 1 мл. При появлении воспаления резко увеличивается количество лейкоцитов в вымени, т.к. их основная функция – защитить организм в случае болезни.
Вследствие этого количество соматических клеток увеличивается до 900-950 тыс. На основе защитной функции организма основаны методы диагностики субклинического мастита.
Для диагностики субклинического мастита у коров предлагаем использовать экспресс-тест ITALMAS SK-TEST от Ижсинтез-Химпром.
ITALMAS SK-TEST позволяет в кратчайшие сроки определить количество соматических клеток в молоке. Перед диагностикой важно сцедить первые струйки молока в специальную чашу для визуальной оценки на состояние консистенции и посторонние примеси. Для проведения теста необходимо сдоить по 2 мл молока в каждую лунку лопатки Шальма.
Это позволит определить соматику каждой четверти вымени в отдельности. После этого нужно добавить 2 мл ITALMAS SK-TEST Через 15 секунд можно оценить результаты диагностики субклинического мастита у коров:
- если состав не изменил консистенцию и остался жидким, количество соматических клеток в пределах нормы, и корова здорова;
- если состав стал более густым, количество соматических клеток превышает норму. Чем гуще состав, тем выше количество соматических клеток, а, значит, и тяжесть заболевания.
Лечение субклинического мастита у коров должно быть комплексным. Устранение всех причин появления мастита и всеобъемлющий характер терапии позволит полностью вылечить заболевание. Кроме этого, необходимо начинать лечение немедленно после обнаружения болезни.